En bioquímica , ABTS ( ácido 2,2'-azino-bis (3-etilbenzotiazolina-6-sulfónico) ) es un compuesto químico utilizado para observar la cinética de reacción de enzimas específicas . Un uso común es en el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas ( ELISA ) para detectar la unión de moléculas entre sí.
Nombres | |
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Nombre IUPAC Ácido 2,2'-azino-bis (3-etilbenztiazolina-6-sulfónico) | |
Identificadores | |
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Modelo 3D ( JSmol ) | |
ChemSpider | |
PubChem CID | |
Tablero CompTox ( EPA ) | |
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Propiedades | |
C 18 H 18 N 4 O 6 S 4 | |
Masa molar | 514,60 g · mol −1 |
Peligros | |
Frases R (desactualizadas) | R36 - R37 - R38 |
Frases S (desactualizadas) | S26 - S36 |
Salvo que se indique lo contrario, los datos se proporcionan para materiales en su estado estándar (a 25 ° C [77 ° F], 100 kPa). | |
verificar ( ¿qué es ?) | |
Referencias de Infobox | |
Se usa comúnmente como sustrato con peróxido de hidrógeno para una enzima peroxidasa (como la peroxidasa de rábano picante ) o solo con enzimas oxidasa multicropina azul (como lacasa o bilirrubina oxidasa ). Su uso permite seguir la cinética de reacción de las propias peroxidasas . De esta manera, también se puede usar para seguir indirectamente la cinética de reacción de cualquier enzima productora de peróxido de hidrógeno , o simplemente para cuantificar la cantidad de peróxido de hidrógeno en una muestra.
Los potenciales de reducción formales de ABTS son lo suficientemente altos como para que actúe como donante de electrones para la reducción de especies oxo como el oxígeno molecular y el peróxido de hidrógeno, particularmente en los valores de pH menos extremos que se encuentran en la catálisis biológica. En estas condiciones, los grupos sulfonato están completamente desprotonados y el mediador existe como un dianión.
- ABTS - · + e - → ABTS 2– E ° ′ = 0,67 V frente a SHE
- ABTS + e - → ABTS - · E ° ′ = 1.08 V frente a SHE [1]
Se elige este compuesto porque la enzima facilita la reacción con el peróxido de hidrógeno, convirtiéndolo en un producto final verde y soluble . Su nuevo máximo de absorbancia de 420 nm de luz (ε = 3,6 × 10 4 M –1 cm –1 ) [2] puede seguirse fácilmente con un espectrofotómetro , un instrumento común de laboratorio. A veces se utiliza como parte de un reactivo de estimación de glucosa cuando se encuentran concentraciones de glucosa en soluciones como el suero sanguíneo .
El ABTS también es utilizado con frecuencia por la industria alimentaria y los investigadores agrícolas para medir las capacidades antioxidantes de los alimentos. [3] En este ensayo, ABTS se convierte en su catión radical mediante la adición de persulfato de sodio . Este catión radical es de color azul y absorbe la luz a 734 nm. [4] El ABTS catión radical reactivo frente a la mayoría de los antioxidantes, incluyendo compuestos fenólicos , tioles y vitamina C . [5] Durante esta reacción, el radical catión azul ABTS se convierte de nuevo a su forma neutra incolora. La reacción puede controlarse espectrofotométricamente. Este ensayo a menudo se denomina ensayo de capacidad antioxidante equivalente de Trolox (TEAC). La reactividad de los diversos antioxidantes probados se comparó con la de Trolox , que es un análogo soluble en agua de la vitamina E . [6]
Aplicaciones para el análisis funcional de alimentos
Basándose en las propiedades químicas especiales de los radicales libres formados, se ha utilizado el ensayo ABTS para determinar la capacidad antioxidante de los productos alimenticios. Por ejemplo, los compuestos de polifenoles, que existen ampliamente en la fruta, pueden apagar los radicales libres dentro del cuerpo humano, evitando así el daño oxidativo de los radicales libres. La potencia antioxidante del extracto vegetal o del producto alimenticio se ha medido mediante el ensayo ABTS. Un ejemplo con un método detallado es el análisis de la actividad antioxidante de los productos Hibiscus. [7]
Referencias
- ↑ Bourbonnais, Robert; Leech, Dónal; Paice, Michael G. (1998-03-02), "Análisis electroquímico de las interacciones de mediadores de lacasa con compuestos modelo de lignina", Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Temas generales , 1379 (3): 381–390, doi : 10.1016 / S0304-4165 (97) 00117-7 , PMID 9545600
- ^ Shin, Kwang-Soo; Lee, Yeo-Jin (2000-12-01), "Purificación y caracterización de un nuevo miembro de la familia Laccase del basidiomiceto Coriolus hirsutus de podredumbre blanca ", Archives of Biochemistry and Biphysics , 384 (1): 109-115, doi : 10.1006 / abbi.2000.2083 , PMID 11147821
- ^ Huang, Dejian; Ou, Boxin; Antes, Donald L. (25 de febrero de 2005), "La química detrás de los ensayos de capacidad antioxidante", J. Agric. Food Chem. , 53 (6): 1841–1856, doi : 10.1021 / jf030723c , PMID 15769103
- ^ Re, Roberta; Pellegrini, Nicoletta; Proteggente, Anna; Pannala, Ananth; Rice-Evans, Catherine (1999-06-02), "Actividad antioxidante aplicando un ensayo mejorado de decoloración de cationes radicales ABTS", Free Radical Biology and Medicine , 26 (9-10): 1231-1237, doi : 10.1016 / S0891-5849 (98) 00315-3 , PMID 10381194
- ^ Walker, Richard B .; Everette, Jace D. (2009-01-29), "Tasas de reacción comparativas de varios antioxidantes con catión radical ABTS", J. Agric. Food Chem. , 57 (4): 1156–1161, doi : 10.1021 / jf8026765 , PMID 19199590
- ^ Barclay, LRC; Locke, SJ; MacNeil, JM (1985), "Autooxidación en micelas - Sinergia de vitamina C con vitamina E soluble en lípidos y Trolox soluble en agua", Can. J. Chem. , 63 (2): 366–374, doi : 10.1139 / v85-062
- ^ Zhen, J .; Villani, TS; Guo, Y .; Qi, Y .; Chin, K .; Pan, MH; Wu, Q. (2016). "Fitoquímica, capacidad antioxidante, contenido fenólico total y actividad antiinflamatoria de las hojas de Hibiscus sabdariffa". Química de los alimentos . 190 : 673–680. doi : 10.1016 / j.foodchem.2015.06.006 . PMID 26213025 .