La antitrombina (AT) es una pequeña molécula de proteína que inactiva varias enzimas del sistema de coagulación . La antitrombina es una glicoproteína producida por el hígado y consta de 432 aminoácidos. Contiene tres enlaces disulfuro y un total de cuatro posibles sitios de glicosilación . La α-antitrombina es la forma dominante de antitrombina que se encuentra en el plasma sanguíneo y tiene un oligosacárido que ocupa cada uno de sus cuatro sitios de glicosilación. Un único sitio de glicosilación permanece constantemente desocupado en la forma menor de antitrombina, β-antitrombina. [5] Su actividad aumenta muchas veces por el fármaco anticoagulante heparina., que mejora la unión de la antitrombina al factor IIa (trombina) y al factor Xa . [6]
SERPINC1 | |||||||||||||||||||||||||
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Identificadores | |||||||||||||||||||||||||
Alias | SERPINC1 , AT3, AT3D, ATIII, THPH7, miembro 1 de la familia C de serpinas, ATIII-R2, ATIII-T2, ATIII-T1 | ||||||||||||||||||||||||
Identificaciones externas | OMIM : 107300 MGI : 88095 HomoloGene : 20139 GeneCards : SERPINC1 | ||||||||||||||||||||||||
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Ortólogos | |||||||||||||||||||||||||
Especies | Humano | Ratón | |||||||||||||||||||||||
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Ubicación (UCSC) | Crónicas 1: 173,9 - 173,92 Mb | Crónicas 1: 160,98 - 161,01 Mb | |||||||||||||||||||||||
Búsqueda en PubMed | [3] | [4] | |||||||||||||||||||||||
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Nomenclatura
La antitrombina también se denomina antitrombina III (AT III). Las designaciones de Antitrombina I hasta Antitrombina IV se originan en los primeros estudios llevados a cabo en la década de 1950 por Seegers, Johnson y Fell. [7]
La antitrombina I (AT I) se refiere a la absorción de trombina en fibrina después de que la trombina ha activado el fibrinógeno . La antitrombina II (AT II) se refiere a un cofactor en el plasma, que junto con la heparina interfiere con la interacción de la trombina y el fibrinógeno . La antitrombina III (AT III) se refiere a una sustancia en el plasma que inactiva la trombina. La antitrombina IV (AT IV) se refiere a una antitrombina que se activa durante y poco después de la coagulación sanguínea . [8] Sólo AT III y posiblemente AT I son médicamente significativos. En general, se hace referencia a AT III únicamente como "Antitrombina" y es la Antitrombina III la que se analiza en este artículo.
Estructura
La antitrombina tiene una vida media en el plasma sanguíneo de alrededor de 3 días. [9] La concentración normal de antitrombina en el plasma sanguíneo humano es alta, aproximadamente 0,12 mg / ml, lo que equivale a una concentración molar de 2,3 μM. [10] Se ha aislado antitrombina del plasma de un gran número de especies además de los humanos. [11] Como se deduce de la secuenciación de proteínas y ADNc , las antitrombinas de vaca, oveja, conejo y ratón tienen 433 aminoácidos de longitud, que es un aminoácido más largo que la antitrombina humana. Se cree que el aminoácido adicional se produce en la posición del aminoácido 6. Las antitrombinas de vaca, oveja, conejo, ratón y humano comparten entre 84 y 89% de identidad de secuencia de aminoácidos. [12] Seis de los aminoácidos forman tres enlaces disulfuro intramoleculares , Cys 8-Cys128, Cys21-Cys95 y Cys248-Cys430. Todos tienen cuatro sitios potenciales de N-glicosilación . Estos ocurren en los números de aminoácidos 96, 135, 155 y 192 de la asparagina (Asn) en humanos y en números de aminoácidos similares en otras especies. Todos estos sitios están ocupados por cadenas laterales de oligosacáridos unidas covalentemente en la forma predominante de antitrombina humana, α-antitrombina, lo que da como resultado un peso molecular para esta forma de antitrombina de 58.200. [5] El sitio potencial de glicosilación en la asparagina 135 no está ocupado en una forma menor (alrededor del 10%) de antitrombina, β-antitrombina (ver Figura 1 ). [13]
Se han producido antitrombinas recombinantes con propiedades similares a las de la antitrombina humana normal usando células de insectos infectadas con baculovirus y líneas de células de mamíferos cultivadas en cultivo celular . [14] [15] [16] [17] Estas antitrombinas recombinantes generalmente tienen patrones de glicosilación diferentes a los de la antitrombina normal y se usan típicamente en estudios estructurales de antitrombina. Por esta razón, muchas de las estructuras de antitrombina almacenadas en el banco de datos de proteínas y presentadas en este artículo muestran patrones de glicosilación variables.
La antitrombina comienza en su estado nativo, que tiene una energía libre más alta en comparación con el estado latente, al que decae en promedio después de 3 días. El estado latente tiene la misma forma que el estado activado, es decir, cuando inhibe la trombina. Como tal, es un ejemplo clásico de la utilidad del control cinético frente al termodinámico del plegamiento de proteínas.
Función
La antitrombina es una serpina (inhibidor de la serina proteasa) y, por lo tanto, es similar en estructura a la mayoría de los otros inhibidores de la proteasa plasmática , como la alfa 1-anticimotripsina , la alfa 2-antiplasmina y el cofactor II de heparina .
Las proteasas diana fisiológicas de la antitrombina son las de la vía de activación por contacto (antes conocida como vía intrínseca), es decir, las formas activadas del Factor X (Xa), Factor IX (IXa), Factor XI (XIa), Factor XII (XIIa). y, en mayor medida, Factor II (trombina) (IIa), y también la forma activada del Factor VII (VIIa) de la vía del factor tisular (anteriormente conocida como vía extrínseca). [20] El inhibidor también inactiva la calicreína y la plasmina [ cita requerida ] , también involucradas en la coagulación sanguínea. Sin embargo, inactiva otras serina proteasas que no están implicadas en la coagulación, como la tripsina y la subunidad C1s de la enzima C1 implicada en la ruta clásica del complemento . [12] [21]
La inactivación de la proteasa se produce como consecuencia de atrapar la proteasa en un complejo equimolar con antitrombina en el que el sitio activo de la enzima proteasa es inaccesible a su sustrato habitual . [12] La formación de un complejo de antitrombina-proteasa implica una interacción entre la proteasa y un enlace peptídico reactivo específico dentro de la antitrombina. En la antitrombina humana, este enlace se produce entre la arginina (arg) 393 y la serina (ser) 394 (ver Figura 2 y Figura 3 ). [12]
Se cree que las enzimas proteasas quedan atrapadas en complejos antitrombina-proteasa inactivos como consecuencia de su ataque al enlace reactivo. Aunque atacar un enlace similar dentro del sustrato de proteasa normal da como resultado una escisión proteolítica rápida del sustrato, el inicio de un ataque sobre el enlace reactivo de antitrombina hace que la antitrombina se active y atrape la enzima en una etapa intermedia del proceso proteolítico. Con el tiempo, la trombina es capaz de romper el enlace reactivo dentro de la antitrombina y un complejo antitrombina-trombina inactivo se disociará; sin embargo, el tiempo que tarda en ocurrir esto puede ser superior a 3 días. [22] Sin embargo, los enlaces P3-P4 y P1'-P2 'pueden ser escindidos rápidamente por la elastasa de neutrófilos y la enzima bacteriana termolisina , respectivamente, dando como resultado antitrombinas inactivas que ya no pueden inhibir la actividad de la trombina. [23]
La tasa de inhibición de la actividad proteasa por antitrombina aumenta en gran medida por su unión adicional a la heparina , al igual que su inactivación por la elastasa de neutrófilos . [23]
Antitrombina y heparina
Antitrombina inactiva sus enzimas diana fisiológicas, trombina, factor Xa y el factor IXa con constantes de velocidad de 7-11 x 10 3 , 2,5 x 10 3 M -1 s -1 y 1 x 10 M -1 s -1 respectivamente. [5] [24] La velocidad de inactivación de antitrombina-trombina aumenta a 1,5 - 4 x 10 7 M −1 s −1 en presencia de heparina, es decir, la reacción se acelera de 2000 a 4000 veces. [25] [26] [27] [28] La inhibición del factor Xa se acelera sólo de 500 a 1000 veces en presencia de heparina y la constante de velocidad máxima es 10 veces menor que la de la inhibición de la trombina. [25] [28] El aumento de la tasa de inhibición del factor antitrombina-IXa muestra un aumento de aproximadamente 1 millón de veces en presencia de heparina y niveles fisiológicos de calcio . [24]
AT-III se une a una secuencia de sulfatación de pentasacárido específica contenida dentro del polímero de heparina
GlcNAc / NS (6S) -GlcA-GlcNS (3S, 6S) -IdoA (2S) -GlcNS (6S)
Tras la unión a esta secuencia de pentasacárido, la heparina aumenta la inhibición de la actividad de la proteasa como resultado de dos mecanismos distintos. [29] En un mecanismo, la estimulación por heparina del factor IXa y la inhibición de Xa depende de un cambio conformacional dentro de la antitrombina que involucra el bucle del sitio reactivo y, por lo tanto, es alostérico . [30] En otro mecanismo, la estimulación de la inhibición de la trombina depende de la formación de un complejo ternario entre AT-III, trombina y heparina. [30]
Activación alostérica
El aumento de la inhibición del factor IXa y Xa requiere la secuencia mínima de pentasacárido de heparina. Los cambios conformacionales que ocurren dentro de la antitrombina en respuesta a la unión del pentasacárido están bien documentados. [18] [31] [32]
En ausencia de heparina, los aminoácidos P14 y P15 (ver Figura 3 ) del bucle del sitio reactivo están incrustados dentro del cuerpo principal de la proteína (específicamente la parte superior de la hoja beta A). Esta característica es común con otras serpinas como el cofactor II de heparina , alfa 1-anticimotripsina y MENT .
El cambio conformacional más relevante para la inhibición del factor IXa y Xa involucra los aminoácidos P14 y P15 dentro de la región N-terminal del bucle del sitio reactivo (encerrado en un círculo en la Figura 4 modelo B ). Esta región se ha denominado región de bisagra. El cambio conformacional dentro de la región bisagra en respuesta a la unión de heparina da como resultado la expulsión de P14 y P15 del cuerpo principal de la proteína y se ha demostrado que al prevenir este cambio conformacional, no se produce un aumento de la inhibición del factor IXa y Xa. [30] Se cree que la mayor flexibilidad dada al bucle del sitio reactivo como resultado del cambio conformacional de la región bisagra es un factor clave para influir en el aumento de la inhibición del factor IXa y Xa. Se ha calculado que en ausencia del pentasacárido solo una de cada 400 moléculas de antitrombina (0,25%) está en conformación activa con los aminoácidos P14 y P15 expulsados. [30]
Activación no alostérica
El aumento de la inhibición de la trombina requiere el pentasacárido de heparina mínimo más al menos 13 unidades monoméricas adicionales. [33] Se cree que esto se debe al requisito de que la antitrombina y la trombina deben unirse a la misma cadena de heparina adyacente entre sí. Esto se puede ver en la serie de modelos que se muestran en la Figura 5 .
En las estructuras mostradas en la Figura 5, la parte C-terminal (lado P ') del bucle del sitio reactivo tiene una conformación extendida en comparación con otras estructuras de antitrombina no activadas o activadas por heparina. [34] La región P 'de la antitrombina es inusualmente larga en relación con la región P' de otras serpinas y en estructuras de antitrombina no activadas o activadas por heparina forma un giro β fuertemente unido por enlaces de hidrógeno . El alargamiento P 'se produce mediante la rotura de todos los enlaces de hidrógeno implicados en el giro β . [34]
La región de bisagra de la antitrombina en el complejo de la Figura 5 no pudo modelarse debido a su flexibilidad conformacional, y los aminoácidos P9-P14 no se ven en esta estructura. Esta flexibilidad conformacional indica que puede existir un equilibrio dentro del complejo entre una conformación de antitrombina insertada en el bucle del sitio reactivo P14 P15 y una conformación expelida por el bucle del sitio reactivo P14 P15. En apoyo de esto, el análisis del posicionamiento de P15 Gly en el complejo de la Figura 5 (etiquetado en el modelo B) muestra que se inserta en la hoja beta A (ver modelo C). [34]
Efecto de la glicosilación sobre la actividad.
La α-antitrombina y la β-antitrombina difieren en su afinidad por la heparina. [35] La diferencia en la constante de disociación entre los dos es tres veces mayor para el pentasacárido que se muestra en la Figura 3 y más de diez veces para la heparina de longitud completa, teniendo la β-antitrombina una mayor afinidad. [36] Se cree que la mayor afinidad de la β-antitrombina se debe a la mayor velocidad a la que ocurren los cambios conformacionales posteriores dentro de la proteína en la unión inicial de heparina. Para la α-antitrombina, no se cree que la glicosilación adicional en Asn-135 interfiera con la unión inicial de heparina, sino que inhiba cualquier cambio conformacional resultante. [35]
Aunque está presente en sólo 5 a 10% de los niveles de α-antitrombina, debido a su mayor afinidad por la heparina, se cree que la β-antitrombina es más importante que la α-antitrombina para controlar los eventos trombogénicos que resultan de la lesión tisular. De hecho, la inhibición de la trombina después de una lesión de la aorta se ha atribuido únicamente a la β-antitrombina. [37]
Papel en la enfermedad
Evidence for the important role antithrombin plays in regulating normal blood coagulation is demonstrated by the correlation between inherited or acquired antithrombin deficiencies and an increased risk of any affected individual developing thrombotic disease.[38] Antithrombin deficiency generally comes to light when a patient suffers recurrent venous thrombosis and pulmonary embolism.
Acquired antithrombin deficiency
Acquired antithrombin deficiency occurs as a result of three distinctly different mechanisms. The first mechanism is increased excretion which may occur with renal failure associated with proteinuria nephrotic syndrome. The second mechanism results from decreased production as seen in liver failure or cirrhosis or an immature liver secondary to premature birth. The third mechanism results from accelerated consumption which is most pronounced as consequence of severe injury trauma but also may be seen on a lesser scale as a result of interventions such as major surgery or cardiopulmonary bypass.[39]
Inherited antithrombin deficiency
The incidence of inherited antithrombin deficiency has been estimated at between 1:2000 and 1:5000 in the normal population, with the first family suffering from inherited antithrombin deficiency being described in 1965.[40][41] Subsequently, it was proposed that the classification of inherited antithrombin deficiency be designated as either type I or type II, based upon functional and immunochemical antithrombin analyses.[42] Maintenance of an adequate level of antithrombin activity, which is at least 70% that of a normal functional level, is essential to ensure effective inhibition of blood coagulation proteases.[43] Typically as a result of type I or type II antithrombin deficiency, functional antithrombin levels are reduced to below 50% of normal.[44]
Type I antithrombin deficiency
Type I antithrombin deficiency is characterized by a decrease in both antithrombin activity and antithrombin concentration in the blood of affected individuals. Type I deficiency was originally further divided into two subgroups, Ia and Ib, based upon heparin affinity. The antithrombin of subgroup Ia individuals showed a normal affinity for heparin while the antithrombin of subgroup Ib individuals showed a reduced affinity for heparin.[45] Subsequent functional analysis of a group of 1b cases found them not only to have reduced heparin affinity but multiple or 'pleiotrophic' abnormalities affecting the reactive site, the heparin binding site and antithrombin blood concentration. In a revised system of classification adopted by the Scientific and Standardization Committee of the International Society on Thrombosis and Haemostasis, type Ib cases are now designated as type II PE, Pleiotrophic effect.[46]
Most cases of type I deficiency are due to point mutations, deletions or minor insertions within the antithrombin gene. These genetic mutations result in type I deficiency through a variety of mechanisms:
- Mutations may produce unstable antithrombins that either may be not exported into the blood correctly upon completion biosynthesis or exist in the blood for a shortened period of time, e.g., the deletion of 6 base pairs in codons 106–108.[47]
- Mutations may affect mRNA processing of the antithrombin gene.
- Minor insertions or deletions may lead to frame shift mutations and premature termination of the antithrombin gene.
- Point mutations may also result in the premature generation of a termination or stop codon e.g. the mutation of codon 129, CGA→TGA (UGA after transcription), replaces a normal codon for arginine with a termination codon.[48]
Type II antithrombin deficiency
Type II antithrombin deficiency is characterized by normal antithrombin levels but reduced antithrombin activity in the blood of affected individuals. It was originally proposed that type II deficiency be further divided into three subgroups (IIa, IIb, and IIc) depending on which antithrombin functional activity is reduced or retained.[45]
- Subgroup IIa - Decreased thrombin inactivation, decreased factor Xa inactivation and decreased heparin affinity.
- Subgroup IIb - Decreased thrombin inactivation and normal heparin affinity.
- Subgroup IIc - Normal thrombin inactivation, normal factor Xa inactivation and decreased heparin affinity.
In the revised system of classification again adopted by the Scientific and Standardization Committee of the International Society on Thrombosis and Haemostasis, type II antithrombin deficiency remains subdivided into three subgroups: the already mentioned type II PE, along with type II RS, where mutations effect the reactive site and type II HBS, where mutations effect the antithrombin heparin binding site.[46] For the purposes of an antithrombin mutational database compiled by members of the Plasma Coagulation Inhibitors Subcommittee of the Scientific and Standardization Committee of the International Society on Thrombosis and Haemostasis, type IIa cases are now classified as type II PE, type IIb cases as type II RS and type IIc cases as type II HBS.[49]
Toponyms
Presently it is relatively easy to characterise a specific antithrombin genetic mutation. However prior to the use of modern characterisation techniques investigators named mutations for the town or city where the individual suffering from the deficiency resided i.e. the antithrombin mutation was designated a toponym.[50] Modern mutational characterisation has since shown that many individual antithrombin toponyms are actually the result of the same genetic mutation, for example Antithrombin-Toyama, is equivalent to Antihrombin-Kumamoto, -Amien, -Tours, -Paris-1, -Paris-2, -Alger, -Padua-2 and -Barcelona.[49]
Usos médicos
Antithrombin is used as a protein therapeutic that can be purified from human plasma[51] or produced recombinantly (for example, Atryn, which is produced in the milk of genetically modified goats.[52][53])
Antithrombin is approved by the FDA as an anticoagulant for the prevention of clots before, during, or after surgery or birthing in patients with hereditary antithrombin deficiency.[51][53]
Antithrombin has been studied in sepsis to reduce diffuse intravascular coagulation and other outcomes. It has not been found to confer any benefit in critically ill people with sepsis.[54]
Antitrombina escindida y latente
Cleavage at the reactive site results in entrapment of the thrombin protease, with movement of the cleaved reactive site loop together with the bound protease, such that the loop forms an extra sixth strand in the middle of beta sheet A. This movement of the reactive site loop can also be induced without cleavage, with the resulting crystallographic structure being identical to that of the physiologically latent conformation of plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1).[55] For this reason the conformation of antithrombin in which the reactive site loop is incorporated uncleaved into the main body of the protein is referred to as latent antithrombin. In contrast to PAI-1 the transition for antithrombin from a normal or native conformation to a latent conformation is irreversible.
Native antithrombin can be converted to latent antithrombin (L-antithrombin) by heating alone or heating in the presence of citrate.[56][57] However, without extreme heating and at 37 °C (body temperature) 10% of all antithrombin circulating in the blood is converted to the L-antithrombin over a 24-hour period.[58][59] The structure of L-antithrombin is shown in Figure 6.
The 3-dimensional structure of native antithrombin was first determined in 1994.[31][32] Unexpectedly the protein crystallized as a heterodimer composed of one molecule of native antithrombin and one molecule of latent antithrombin. Latent antithrombin on formation immediately links to a molecule of native antithrombin to form the heterodimer, and it is not until the concentration of latent antithrombin exceeds 50% of the total antithrombin that it can be detected analytically.[59] Not only is the latent form of antithrombin inactive against its target coagulation proteases, but its dimerisation with an otherwise active native antithrombin molecule also results in the native molecules inactivation. The physiological impact of the loss of antithrombin activity either through latent antithrombin formation or through subsequent dimer formation is exacerbated by the preference for dimerisation to occur between heparin activated β-antithrombin and latent antithrombin as opposed to α-antithrombin.[59]
A form of antithrombin that is an intermediate in the conversion between native and latent forms of antithrombin has also been isolated and this has been termed prelatent antithrombin.[60]
Antitrombina antiangiogénica
Angiogenesis is a physiological process involving the growth of new blood vessels from pre-existing vessels. Under normal physiological conditions angiogenesis is tightly regulated and is controlled by a balance of angiogenic stimulators and angiogenic inhibitors. Tumor growth is dependent upon angiogenesis and during tumor development a sustained production of angiogenic stimulatory factors is required along with a reduction in the quantity of angiogenic inhibitory factors tumor cells produce.[61] The cleaved and latent form of antithrombin potently inhibit angiogenesis and tumor growth in animal models.[62] The prelatent form of antithrombin has been shown to inhibit angiogenesis in-vitro but to date has not been tested in experimental animal models.
Referencias
- ^ a b c GRCh38: Ensembl release 89: ENSG00000117601 - Ensembl, May 2017
- ^ a b c GRCm38: Ensembl release 89: ENSMUSG00000026715 - Ensembl, May 2017
- ^ "Human PubMed Reference:". National Center for Biotechnology Information, U.S. National Library of Medicine.
- ^ "Mouse PubMed Reference:". National Center for Biotechnology Information, U.S. National Library of Medicine.
- ^ a b c Bjork, I; Olson, JE (1997). Antithrombin, A bloody important serpin (in Chemistry and Biology of Serpins). Plenum Press. pp. 17–33. ISBN 978-0-306-45698-5.
- ^ Finley, Alan; Greenberg, Charles (2013-06-01). "Review article: heparin sensitivity and resistance: management during cardiopulmonary bypass". Anesthesia and Analgesia. 116 (6): 1210–1222. doi:10.1213/ANE.0b013e31827e4e62. ISSN 1526-7598. PMID 23408671. S2CID 22500786.
- ^ Seegers WH, Johnson JF, Fell C (1954). "An antithrombin reaction to prothrombin activation". Am. J. Physiol. 176 (1): 97–103. doi:10.1152/ajplegacy.1953.176.1.97. PMID 13124503.
- ^ Yin ET, Wessler S, Stoll PJ (1971). "Identity of plasma-activated factor X inhibitor with antithrombin 3 and heparin cofactor". J. Biol. Chem. 246 (11): 3712–3719. doi:10.1016/S0021-9258(18)62185-4. PMID 4102937.
- ^ Collen D, Schetz J, de Cock F, Holmer E, Verstraete M (1977). "Metabolism of antithrombin III (heparin cofactor) in man: Effects of venous thrombosis of heparin administration". Eur. J. Clin. Invest. 7 (1): 27–35. doi:10.1111/j.1365-2362.1977.tb01566.x. PMID 65284. S2CID 22494710.
- ^ Conard J, Brosstad F, Lie Larsen M, Samama M, Abildgaard U (1983). "Molar antithrombin concentration in normal human plasma". Haemostasis. 13 (6): 363–368. doi:10.1159/000214823. PMID 6667903.
- ^ Jordan RE (1983). "Antithrombin in vertebrate species: Conservation of the heparin-dependent anticoagulant mechanism". Arch. Biochem. Biophys. 227 (2): 587–595. doi:10.1016/0003-9861(83)90488-5. PMID 6607710.
- ^ a b c d Olson ST, Björk I (1994). "Regulation of thrombin activity by antithrombin and heparin". Sem. Thromb. Hemost. 20 (4): 373–409. doi:10.1055/s-2007-1001928. PMID 7899869.
- ^ Brennan SO, George PM, Jordan RE (1987). "Physiological variant of antithrombin-III lacks carbohydrate side-chain at Asn 135". FEBS Lett. 219 (2): 431–436. doi:10.1016/0014-5793(87)80266-1. PMID 3609301. S2CID 35438503.
- ^ Stephens AW, Siddiqui A, Hirs CH (1987). "Expression of functionally active human antithrombin III". Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 84 (11): 3886–3890. doi:10.1073/pnas.84.11.3886. PMC 304981. PMID 3473488.
- ^ Zettlmeissl G, Conradt HS, Nimtz M, Karges HE (1989). "Characterization of recombinant human antithrombin III synthesized in Chinese hamster ovary cells". J. Biol. Chem. 264 (35): 21153–21159. doi:10.1016/S0021-9258(19)30060-2. PMID 2592368.
- ^ Gillespie LS, Hillesland KK, Knauer DJ (1991). "Expression of biologically active human antithrombin III by recombinant baculovirus in Spodoptera frugiperda cells". J. Biol. Chem. 266 (6): 3995–4001. doi:10.1016/S0021-9258(19)67892-0. PMID 1995647.
- ^ Ersdal-Badju E, Lu A, Peng X, Picard V, Zendehrouh P, Turk B, Björk I, Olson ST, Bock SC (1995). "Elimination of glycosylation heterogeneity affecting heparin affinity of recombinant human antithrombin III by expression of a beta-like variant in baculovirus-infected insect cells". Biochem. J. 310 (Pt 1): 323–330. doi:10.1042/bj3100323. PMC 1135891. PMID 7646463.
- ^ a b Whisstock JC, Pike RN, et al. (2000). "Conformational changes in serpins: II. The mechanism of activation of antithrombin by heparin". J. Mol. Biol. 301 (5): 1287–1305. doi:10.1006/jmbi.2000.3982. PMID 10966821.
- ^ Schechter I, Berger A (1967). "On the size of the active site in proteases. I. Papain". Biochem. Biophys. Res. Commun. 27 (2): 157–162. doi:10.1016/S0006-291X(67)80055-X. PMID 6035483.
- ^ Persson E, Bak H, Olsen OH (2001). "Substitution of valine for leucine 305 in factor VIIa increases the intrinsic enzymatic activity". J. Biol. Chem. 276 (31): 29195–29199. doi:10.1074/jbc.M102187200. PMID 11389142.
- ^ Ogston D, Murray J, Crawford GP (1976). "Inhibition of the activated Cls subunit of the first component of complement by antithrombin III in the presence of heparin". Thromb. Res. 9 (3): 217–222. doi:10.1016/0049-3848(76)90210-3. PMID 982345.
- ^ Danielsson A, Björk I (1980). "Slow, spontaneous dissociation of the antithrombin-thrombin complex produces a proteolytically modified form of the inhibitor". FEBS Lett. 119 (2): 241–244. doi:10.1016/0014-5793(80)80262-6. PMID 7428936. S2CID 40067251.
- ^ a b Chang WS, Wardell MR, Lomas DA, Carrell RW (1996). "Probing serpin reactive-loop conformations by proteolytic cleavage". Biochem. J. 314 (2): 647–653. doi:10.1042/bj3140647. PMC 1217096. PMID 8670081.
- ^ a b Bedsted T, Swanson R, Chuang YJ, Bock PE, Björk I, Olson ST (2003). "Heparin and calcium ions dramatically enhance antithrombin reactivity with factor IXa by generating new interaction exosites". Biochemistry. 42 (27): 8143–8152. doi:10.1021/bi034363y. PMID 12846563.
- ^ a b Jordan RE, Oosta GM, Gardner WT, Rosenberg RD (1980). "The kinetics of hemostatic enzyme-antithrombin interactions in the presence of low molecular weight heparin". J. Biol. Chem. 255 (21): 10081–10090. doi:10.1016/S0021-9258(19)70431-1. PMID 6448846.
- ^ Griffith MJ (1982). "Kinetics of the heparin-enhanced antithrombin III/thrombin reaction. Evidence for a template model for the mechanism of action of heparin". J. Biol. Chem. 257 (13): 7360–7365. doi:10.1016/S0021-9258(18)34385-0. PMID 7085630.
- ^ Olson ST, Björk I (1991). "Predominant contribution of surface approximation to the mechanism of heparin acceleration of the antithrombin-thrombin reaction. Elucidation from salt concentration effects". J. Biol. Chem. 266 (10): 6353–6354. doi:10.1016/S0021-9258(18)38125-0. PMID 2007588.
- ^ a b Olson ST, Björk I, Sheffer R, Craig PA, Shore JD, Choay J (1992). "Role of the antithrombin-binding pentasaccharide in heparin acceleration of antithrombin-proteinase reactions. Resolution of the antithrombin conformational change contribution to heparin rate enhancement". J. Biol. Chem. 267 (18): 12528–12538. doi:10.1016/S0021-9258(18)42309-5. PMID 1618758.
- ^ Johnson DJ, Langdown J, Li W, Luis SA, Baglin TP, Huntington JA (2006). "Crystal structure of monomeric native antithrombin reveals a novel reactive center loop conformation". J. Biol. Chem. 281 (46): 35478–35486. doi:10.1074/jbc.M607204200. PMC 2679979. PMID 16973611.
- ^ a b c d Langdown J, Johnson DJ, Baglin TP, Huntington JA (2004). "Allosteric activation of antithrombin critically depends upon hinge region extension". J. Biol. Chem. 279 (45): 47288–47297. doi:10.1074/jbc.M408961200. PMID 15326167.
- ^ a b Schreuder HA, de Boer B, Dijkema R, Mulders J, Theunissen HJ, Grootenhuis PD, Hol WG (1994). "The intact and cleaved human antithrombin III complex as a model for serpin-proteinase interactions". Nature Structural & Molecular Biology. 1 (1): 48–54. doi:10.1038/nsb0194-48. PMID 7656006. S2CID 39110624.
- ^ a b Carrell RW, Stein PE, Fermi G, Wardell MR (1994). "Biological implications of a 3 A structure of dimeric antithrombin". Structure. 2 (4): 257–270. doi:10.1016/S0969-2126(00)00028-9. PMID 8087553.
- ^ Petitou M, Hérault JP, Bernat A, Driguez PA, Duchaussoy P, Lormeau JC, Herbert JM (1999). "Synthesis of Thrombin inhibiting Heparin mimetics without side effects". Nature. 398 (6726): 417–422. doi:10.1038/18877. PMID 10201371. S2CID 4339441.
- ^ a b c Li W, Johnson DJ, Esmon CT, Huntington JA (2004). "Structure of the antithrombin-thrombin-heparin ternary complex reveals the antithrombotic mechanism of heparin". Nature Structural & Molecular Biology. 11 (9): 857–862. doi:10.1038/nsmb811. PMID 15311269. S2CID 28790576.
- ^ a b McCoy AJ, Pei XY, Skinner R, Abrahams JP, Carrell RW (2003). "Structure of beta-antithrombin and the effect of glycosylation on antithrombin's heparin affinity and activity". J. Mol. Biol. 326 (3): 823–833. doi:10.1016/S0022-2836(02)01382-7. PMID 12581643.
- ^ Turk B, Brieditis I, Bock SC, Olson ST, Björk I (1997). "The oligosaccharide side chain on Asn-135 of alpha-antithrombin, absent in beta-antithrombin, decreases the heparin affinity of the inhibitor by affecting the heparin-induced conformational change". Biochemistry. 36 (22): 6682–6691. doi:10.1021/bi9702492. PMID 9184148.
- ^ Frebelius S, Isaksson S, Swedenborg J (1996). "Thrombin inhibition by antithrombin III on the subendothelium is explained by the isoform AT beta". Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 16 (10): 1292–1297. doi:10.1161/01.ATV.16.10.1292. PMID 8857927.
- ^ van Boven HH, Lane DA (1997). "Antithrombin and its inherited deficiency states". Semin. Hematol. 34 (3): 188–204. PMID 9241705.
- ^ Maclean PS, Tait RC (2007). "Hereditary and acquired antithrombin deficiency: epidemiology, pathogenesis and treatment options". Drugs. 67 (10): 1429–1440. doi:10.2165/00003495-200767100-00005. PMID 17600391. S2CID 46971091.
- ^ Lane DA, Kunz G, Olds RJ, Thein SL (1996). "Molecular genetics of antithrombin deficiency". Blood Rev. 10 (2): 59–74. doi:10.1016/S0268-960X(96)90034-X. PMID 8813337.
- ^ Egeberg O (1965). "Inherited antithrombin deficiency causing thrombophilia". Thromb. Diath. Haemorrh. 13 (2): 516–530. doi:10.1055/s-0038-1656297. PMID 14347873.
- ^ Sas G, Petö I, Bánhegyi D, Blaskó G, Domján G (1980). "Heterogeneity of the "classical" antithrombin III deficiency". Thromb. Haemost. 43 (2): 133–136. doi:10.1055/s-0038-1650034. PMID 7455972.
- ^ Lane DA, Olds RJ, Conard J, Boisclair M, Bock SC, Hultin M, Abildgaard U, Ireland H, Thompson E, Sas G (1992). "Pleiotropic effects of antithrombin strand 1C substitution mutations". J. Clin. Invest. 90 (6): 2422–2433. doi:10.1172/JCI116133. PMC 443398. PMID 1469094.
- ^ Lane DA, Olds RJ, Thein SL (1994). "Antithrombin III: summary of first database update". Nucleic Acids Res. 22 (17): 3556–3559. PMC 308318. PMID 7937056.
- ^ a b Sas G (1984). "Hereditary antithrombin III deficiency: biochemical aspects". Haematologica. 17 (1): 81–86. PMID 6724355.
- ^ a b Lane DA, Olds RJ, Boisclair M, Chowdhury V, Thein SL, Cooper DN, Blajchman M, Perry D, Emmerich J, Aiach M (1993). "Antithrombin III mutation database: first update. For the Thrombin and its Inhibitors Subcommittee of the Scientific and Standardization Committee of the International Society on Thrombosis and Haemostasis". Thromb. Haemost. 70 (2): 361–369. doi:10.1055/s-0038-1649581. PMID 8236149.
- ^ Olds RJ, Lane DA, Beresford CH, Abildgaard U, Hughes PM, Thein SL (1993). "A recurrent deletion in the antithrombin gene, AT106-108(-6 bp), identified by DNA heteroduplex detection". Genomics. 16 (1): 298–299. doi:10.1006/geno.1993.1184. PMID 8486379.
- ^ Olds RJ, Lane DA, Ireland H, Finazzi G, Barbui T, Abildgaard U, Girolami A, Thein SL (1991). "A common point mutation producing type 1A antithrombin III deficiency: AT129 CGA to TGA (Arg to Stop)". Thromb. Res. 64 (5): 621–625. doi:10.1016/S0049-3848(05)80011-8. PMID 1808766.
- ^ a b Imperial College London, Faculty of Medicine, Antithrombin Mutation Database. Retrieved on 2008-08-16.
- ^ Blajchman MA, Austin RC, Fernandez-Rachubinski F, Sheffield WP (1992). "Molecular basis of inherited human antithrombin deficiency". Blood. 80 (9): 2159–2171. doi:10.1182/blood.V80.9.2159.2159. PMID 1421387.
- ^ a b "Thrombate III label" (PDF). Archived from the original (PDF) on 2012-11-15. Retrieved 2013-02-23.
- ^ FDA website for ATryn (BL 125284)
- ^ a b Antithrombin (Recombinant) US Package Insert ATryn for Injection February 3, 2009
- ^ Allingstrup, Mikkel; Wetterslev, Jørn; Ravn, Frederikke B.; Møller, Ann Merete; Afshari, Arash (9 February 2016). "Antithrombin III for critically ill patients: a systematic review with meta-analysis and trial sequential analysis". Intensive Care Medicine. 42 (4): 505–520. doi:10.1007/s00134-016-4225-7. PMC 2137061. PMID 26862016.
- ^ Mottonen J, Strand A, Symersky J, Sweet RM, Danley DE, Geoghegan KF, Gerard RD, Goldsmith EJ (1992). "Structural basis of latency in plasminogen activator inhibitor-1". Nature. 355 (6357): 270–273. doi:10.1038/355270a0. PMID 1731226. S2CID 4365370.
- ^ Chang WS, Harper PL (1997). "Commercial antithrombin concentrate contains inactive L-forms of antithrombin". Thromb. Haemost. 77 (2): 323–328. doi:10.1055/s-0038-1655962. PMID 9157590.
- ^ Wardell MR, Chang WS, Bruce D, Skinner R, Lesk AM, Carrell RW (1997). "Preparative induction and characterization of L-antithrombin: a structural homologue of latent plasminogen activator inhibitor-1". Biochemistry. 36 (42): 13133–13142. doi:10.1021/bi970664u. PMID 9335576.
- ^ Carrell RW, Huntington JA, Mushunje A, Zhou A (2001). "The conformational basis of thrombosis". Thromb. Haemost. 86 (1): 14–22. doi:10.1055/s-0037-1616196. PMID 11487000.
- ^ a b c Zhou A, Huntington JA, Carrell RW (1999). "Formation of the antithrombin heterodimer in vivo and the onset of thrombosis". Blood. 94 (10): 3388–3396. doi:10.1182/blood.V94.10.3388.422k20_3388_3396. PMID 10552948.
- ^ Larsson H, Akerud P, Nordling K, Raub-Segall E, Claesson-Welsh L, Björk I (2001). "A novel anti-angiogenic form of antithrombin with retained proteinase binding ability and heparin affinity". J. Biol. Chem. 276 (15): 11996–12002. doi:10.1074/jbc.M010170200. PMID 11278631.
- ^ O'Reilly MS (2007). "Antiangiogenic antithrombin". Semin. Thromb. Hemost. 33 (7): 660–666. doi:10.1055/s-2007-991533. PMID 18000792.
- ^ O'Reilly MS, Pirie-Shepherd S, Lane WS, Folkman J (1999). "Antiangiogenic activity of the cleaved conformation of the serpin antithrombin". Science. 285 (5435): 1926–1928. doi:10.1126/science.285.5435.1926. PMID 10489375.
Otras lecturas
- Panzer-Heinig, Sabine (2009). Antithrombin (III) - Establishing Pediatric Reference Values, Relevance for DIC 1992 versus 2007 (Thesis). Medizinische Fakultät Charité - Universitätsmedizin Berlin.
enlaces externos
- The MEROPS online database for peptidases and their inhibitors: I04.018
- Antithrombin+III at the US National Library of Medicine Medical Subject Headings (MeSH)
- Human SERPINC1 genome location and SERPINC1 gene details page in the UCSC Genome Browser.