La albúmina de suero bovino ( BSA o "Fracción V" ) es una proteína de albúmina de suero derivada de vacas. A menudo se utiliza como estándar de concentración de proteínas en experimentos de laboratorio.
albúmina | ||||||
---|---|---|---|---|---|---|
Identificadores | ||||||
Organismo | ||||||
Símbolo | ALBA | |||||
Entrez | 280717 | |||||
HomoloGene | 105925 | |||||
RefSeq (ARNm) | NM_180992 | |||||
RefSeq (Prot) | NP_851335 | |||||
UniProt | P02769 | |||||
Otros datos | ||||||
Cromosoma | 6: 91,54 - 91,57 Mb | |||||
|
El apodo "Fracción V" se refiere a que la albúmina es la quinta fracción de la metodología de purificación original de Edwin Cohn que hizo uso de las características diferenciales de solubilidad de las proteínas plasmáticas . Al manipular las concentraciones de disolvente, el pH, los niveles de sal y la temperatura , Cohn pudo extraer sucesivas "fracciones" de plasma sanguíneo . El proceso se comercializó primero con albúmina humana para uso médico y luego se adoptó para la producción de BSA.
Propiedades
La proteína precursora de BSA de longitud completa tiene una longitud de 607 aminoácidos (AA). Un péptido señal N-terminal de 18 residuos se corta de la proteína precursora tras la secreción, por lo que el producto proteico inicial contiene 589 residuos de aminoácidos. Se escinden seis aminoácidos adicionales para producir la proteína BSA madura que contiene 583 aminoácidos. [1]
Péptido | Posición | Longitud (AA) | MW Da |
---|---|---|---|
Precursor de cuerpo entero | 1 - 607 | 607 | 69,324 |
Péptido señal | 1 - 18 | 18 | 2.107 |
Propéptido | 19-24 | 6 | 478 |
Proteína madura | 25 - 607 | 583 | 66.463 |
Propiedades físicas de BSA:
- Número de residuos de aminoácidos: 583
- Peso molecular: 66.463 Da (= 66,5 kDa)
- punto isoeléctrico en agua a 25 ° C: 4,7 [2]
- Coeficiente de extinción de 43,824 M −1 cm −1 a 279 nm [3]
- Dimensiones: 140 × 40 × 40 Å (elipsoide alargado donde a = b
)>[4] - pH de la solución al 1%: 5,2-7 [5] [6]
- Rotación óptica: [α] 259 : -61 °; [α] 264 : -63 ° [5] [6]
- Radio de Stokes (r s ): 3,48 nm [7]
- Constante de sedimentación, S 20, W × 10 13 : 4,5 (monómero), 6,7 (dímero) [5] [6]
- Constante de difusión, D 20, W × 10 −7 cm 2 / s: 5,9 [5] [6]
- Volumen específico parcial, V 20 : 0,733 [5] [6]
- Viscosidad intrínseca, η: 0,0413 [5] [6]
- Relación de fricción, f / f0: 1.30 [5] [6]
- Incremento del índice de refracción (578 nm) × 10 −3 : 1,90 [5] [6]
- Absorbancia óptica, A 279 nm 1 g / L : 0,667 [5] [6]
- ε 280 = 43,824 mM −1 cm −1 [8]
- Rotación media de residuos, [m '] 233 : 8443 [5] [6]
- Elipticidad media del residuo: 21,1 [] 209 nm ; 20,1 [θ] 222 nm [5] [6]
- Hélice a estimada,%: 54 [5] [6]
- Forma b estimada,%: 18 [5] [6]
Aplicaciones
BSA tiene numerosas aplicaciones bioquímicas que incluyen ELISA (ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas), inmunotransferencias e inmunohistoquímica . Debido a que la BSA es una proteína pequeña, estable y moderadamente no reactiva, a menudo se usa como bloqueador en inmunohistoquímica. [9] Durante la inmunohistoquímica, que es el proceso que utiliza anticuerpos para identificar antígenos en las células, las secciones de tejido a menudo se incuban con bloqueadores de BSA para unir sitios de unión inespecíficos. [10] [11] Esta unión de BSA a sitios de unión inespecíficos aumenta la posibilidad de que los anticuerpos se unan solo a los antígenos de interés. [12] El bloqueador BSA mejora la sensibilidad al disminuir el ruido de fondo ya que los sitios están cubiertos con la proteína moderadamente no reactiva. [13] [14] Durante este proceso, la minimización de la unión inespecífica de anticuerpos es esencial para adquirir la relación señal / ruido más alta. [13] BSA también se utiliza como nutriente en cultivos celulares y microbianos. En los digestiones de restricción , BSA se usa para estabilizar algunas enzimas durante la digestión del ADN y para prevenir la adhesión de la enzima a los tubos de reacción, puntas de pipeta y otros recipientes. [15] Esta proteína no afecta a otras enzimas que no la necesitan para estabilizarse. La BSA también se usa comúnmente para determinar la cantidad de otras proteínas, comparando una cantidad desconocida de proteína con cantidades conocidas de BSA (ver el ensayo de proteínas de Bradford ). La BSA se utiliza debido a su capacidad para aumentar la señal en los ensayos, su falta de efecto en muchas reacciones bioquímicas y su bajo costo, ya que se pueden purificar fácilmente grandes cantidades a partir de sangre bovina, un subproducto de la industria ganadera. Otro uso de BSA es que se puede utilizar para aislar temporalmente sustancias que bloquean la actividad de la enzima que se necesita, impidiendo así la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). [16] BSA se ha utilizado ampliamente como plantilla para sintetizar nanoestructuras. [17]
BSA también es el componente principal del suero bovino fetal , un medio de cultivo celular común.
Ver también
- Ingesta diaria aceptable
- Alergia a las proteínas
- Albúmina de suero humano
- Albúmina de suero
Referencias
- ^ Majorek KA, Porebski PJ, Dayal A, Zimmerman MD, Jablonska K, Stewart AJ, Chruszcz M, Minor W (octubre de 2012). "Caracterización estructural e inmunológica de albúminas séricas de bovinos, equinos y conejos" . Inmunología molecular . 52 (3–4): 174–82. doi : 10.1016 / j.molimm.2012.05.011 . PMC 3401331 . PMID 22677715 .
- ^ Ge S, Kojio K, Takahara A, Kajiyama T (1998). "Adsorción de albúmina de suero bovino en la superficie de organotriclorosilano inmovilizado: influencia de la separación de fases en los patrones de adsorción de proteínas". Revista de ciencia de biomateriales, edición de polímeros . 9 (2): 131–50. doi : 10.1163 / 156856298x00479 . PMID 9493841 .
- ^ Peters T (1975). Putman FW (ed.). Las proteínas plasmáticas . Prensa académica. págs. 133–181.
- ^ Wright AK, Thompson MR (febrero de 1975). "Estructura hidrodinámica de la albúmina de suero bovino determinada por birrefringencia eléctrica transitoria" . Revista biofísica . 15 (2 Pt 1): 137–41. doi : 10.1016 / S0006-3495 (75) 85797-3 . PMC 1334600 . PMID 1167468 .
- ^ a b c d e f g h yo j k l m Putnam FW (1975). Las proteínas plasmáticas: estructura, función y control genético . 1 (2ª ed.). Nueva York: Academic Press. págs. 141, 147. ASIN B007ESU1JQ .
- ^ a b c d e f g h yo j k l m "Albúmina de suero bovino" (PDF) . Sigma-Aldrich . Consultado el 5 de julio de 2013 .
- ^ Axelsson I (mayo de 1978). "Caracterización de proteínas y otras macromoléculas mediante cromatografía en gel de agarosa". Journal of Chromatography A . 152 (1): 21–32. doi : 10.1016 / S0021-9673 (00) 85330-3 .
- ^ "CONSEJO TÉCNICO # 6 Coeficientes de extinción" (PDF) . Thermo Fisher Scientific . Consultado el 29 de abril de 2021 .
- ^ "Albúminas séricas y alergias" . Base de conocimientos de biología estructural . Instituto Nacional de Ciencias Médicas Generales de los Institutos Nacionales de Salud. Octubre 2013.
- ^ "¿Qué es la inmunohistoquímica (IHC)" . Inmunohistoquímica . Sino Biological Inc.
- ^ Farwell AP, Dubord-Tomasetti SA (septiembre de 1999). "La hormona tiroidea regula la expresión de laminina en el cerebelo de rata en desarrollo" . Endocrinología . 140 (9): 4221–7. doi : 10.1210 / es.140.9.4221 . PMID 10465295 .
- ^ >. "Consejos para reducir el fondo de ELISA" . Biocompare . Comparar redes. 8 de octubre de 2012.
- ^ a b Ouellet, Michel (24 de diciembre de 2006). "Cómo funciona el bloqueo en el análisis inmunocitoquímico con suero o BSA" . Red MadSci: Bioquímica . Red MadSci.
- ^ "Blocker ™ BSA (10X) en PBS" . Thermo Fisher Scientific . Thermo Fisher Scientific Inc. Archivado desde el original el 30 de marzo de 2017.
- ^ "Preguntas frecuentes de BSA" . Invitrogen. Archivado desde el original el 28 de diciembre de 2011 . Consultado el 19 de enero de 2012 .
- ^ Kreader CA (marzo de 1996). "Alivio de la inhibición de la amplificación en PCR con albúmina de suero bovino o proteína T4 del gen 32" . Microbiología aplicada y ambiental . 62 (3): 1102–6. PMC 167874 . PMID 8975603 .
- ^ Rahmani T, Hajian A, Afkhami A, Bagheri H (2018). "Una capa de detección sin enzimas novedosa y de alto rendimiento para la detección electroquímica de metil paratión basada en nanoclusters bimetálicos Au-Ag con plantilla de BSA". Nueva Revista de Química . 42 (9): 7213-22. doi : 10.1039 / C8NJ00425K .
Otras lecturas
- Hirayama K, Akashi S, Furuya M, Fukuhara K (diciembre de 1990). "Rápida confirmación y revisión de la estructura primaria de la albúmina de suero bovino por ESIMS y Frit-FAB LC / MS". Comunicaciones de investigación bioquímica y biofísica . 173 (2): 639–46. doi : 10.1016 / S0006-291X (05) 80083-X . PMID 2260975 .
- Zhang M, Desai T, Ferrari M (mayo de 1998). "Proteínas y células en superficies de silicio inmovilizadas con PEG" (PDF) . Biomateriales . 19 (10): 953–60. doi : 10.1016 / S0142-9612 (98) 00026-X . PMID 9690837 .[ enlace muerto permanente ]
- Wise SA, Watters RL (30 de junio de 2010). "Albúmina de suero bovino (solución al 7%)" (pdf) . Certificado de análisis . Instituto Nacional de Estándares y Tecnología de los Estados Unidos . Consultado el 22 de diciembre de 2011 .
enlaces externos
- Suero + Albúmina, + Bovino en la Biblioteca Nacional de Medicina de EE. UU. Encabezamientos de temas médicos (MeSH)