Era hijo de John Anstruther y Margaret Clephane, hija de George Clephane de Carslogie. Su segunda esposa fue Margaret Learmonth, hija de James Learmonth de Dairsie y Balcomie.
En febrero de 1584, James VI nombró a John Anstruther de ese Ilk, ya su hijo James Anstruther "feuar" de Anstruther, para ser investigadores de las costumbres de Anstruther . [1]
James Anstruther se desempeñó como tallador (o copero) y posteriormente como maestro de familia de Ana de Dinamarca , la esposa de Jacobo VI de Escocia . Además de los deberes ceremoniales y la asistencia, el papel implicaba dar cuenta de la comida y las dietas de los sirvientes y cortesanos designados para la casa real, y una descripción general de las finanzas de la casa. [2] Entre los gastos registrados de la casa, pagó a los sirvientes daneses de la reina £ 600 escoceses por sus honorarios y salarios durante el período de Whitsunday de 1593, pero la factura de Martinmas fue de solo £ 400. [3] Anstruther fue elogiado por James VI por sus esfuerzos para reducir los costos de la casa de su reina el 17 de mayo de 1595, y le asignaron el cargo de por vida. [4]El papel fue compartido por Harry Lindsay de Kinfauns , Patrick Hume de Polwarth y David Beaton de Melgund . [5]
En septiembre de 1594, Anstruther fue arrestado e interrogado, sospechoso con John Wemyss de Logie de ayudar al rebelde Francis Stewart, quinto conde de Bothwell . [6]
En marzo de 1595, Anstruther participó en una lucha en Edimburgo con el preboste, Alexander Home de North Berwick y el laird de Ferniehirst , Thomas Kerr. Uno de los jardineros del palacio de Holyrood, John Morrison, había herido a un sirviente de Ferniehirst. Encarceló al jardinero en el alojamiento de su esposa en Edimburgo, en la casa de Thomas Craig en la Royal Mile . Ana de Dinamarca envió a Anstruther a rescatar a Morrison, y él trajo mazos (llamados "martillos de foir") para irrumpir en la casa. El preboste intervino y encarceló al jardinero en el Tolbooth . Ana de Dinamarca envió a James VI en el castillo de Stirling para conseguir su apoyo y los baillies de Edimburgo John MacMorrany William Hamilton también viajaron a Stirling para dar su versión de los hechos. [7]
En 1598 se unió a un plan para reasentar la isla de Lewis con un grupo conocido como los Caballeros Aventureros de Fife . [8]