Karl I de Anhalt-Zerbst (17 de noviembre de 1534 en Dessau - 4 de mayo de 1561 en Zerbst ), fue un príncipe alemán de la Casa de Ascania y gobernante del principado de Anhalt-Zerbst .
Era el hijo mayor de Juan V, príncipe de Anhalt-Zerbst , de su esposa Margaret , hija de Joachim I Nestor, elector de Brandeburgo .
Después de la muerte de su padre en 1551, Karl heredó Anhalt-Zerbst junto con sus hermanos menores Joachim Ernest y Bernhard VII según la ley de familia de la Casa de Ascania, sin ninguna división de los territorios del principado.
En Zerbst, el 16 de mayo de 1557, Karl se casó con Anna (5 de febrero de 1531-13 de octubre de 1592), hija de Barnim XI, duque de Pomerania . La unión no tuvo hijos.
Karl murió siete meses antes que su último tío superviviente, Joachim I, príncipe de Anhalt-Dessau . Fueron sus hermanos y sus sucesores quienes heredaron los territorios del principado de Joaquín.