La microscopía multifotónica multifotónica es una técnica de microscopía para generar imágenes en 3D , que utiliza un rayo láser , separado por una serie de microlentes en varios haces, enfocados en la muestra. [1] Las múltiples señales se proyectan en una cámara CCD de la misma manera que en un microscopio convencional. La velocidad de imagen está determinada por la velocidad de fotogramas de la cámara , dependiendo de la velocidad de lectura y el número de píxeles, y puede oscilar muy por encima de 30 imágenes / s. [2]
Aprovechando las propiedades específicas de la excitación multifotónica en modo pulsado, se ha resuelto el conflicto entre la densidad de los focos, es decir, el grado de paralelización, y el corte axial. [3] Los pulsos de láser de focos vecinos están separados temporalmente por al menos una duración de pulso, de modo que se evitan las interferencias. Este método se conoce como multiplexación en el tiempo (TMX). Además, con un alto grado de multiplicidad de tiempo , la distancia interfocal se puede reducir hasta tal punto que el escaneo lateral se vuelve obsoleto. En este caso, el escaneo axial es suficiente para grabar una imagen en 3D.