La 5-etinil-2′-desoxiuridina ( EdU ) es un análogo de la timidina que se incorpora al ADN de las células en división. EdU se utiliza para analizar la síntesis de ADN en cultivos celulares y detectar células en animales embrionarios, neonatales y adultos que se han sometido a la síntesis de ADN. [1] Si bien en dosis altas puede ser citotóxica, esta molécula ahora se usa ampliamente para rastrear células en proliferación en múltiples sistemas biológicos.
El etiquetado EdU permite aislar las células sin desnaturalizar el ARN, lo que permite a los investigadores determinar el perfil transcripcional de las células. [2] Este enfoque se ha utilizado para evaluar la transcripción en células neuronales [3] y tejidos [4] que se han dividido recientemente in vitro o in vivo .
EdU se detecta con una azida fluorescente que forma un enlace covalente usando química de clic . [1] [5] A diferencia de la bromodesoxiuridina de uso común , la detección de EdU no requiere tratamiento con calor o ácido. EdU incorporado en el ADN induce daño en el ADN , principalmente durante la replicación del ADN , lo que se refleja en la fosforilación de la histona H2AX , la detención de la progresión del ciclo celular y la apoptosis . [6]