Cas4 es una endonucleasa que se encuentra en algunos sistemas CRISPR y que se utiliza como parte de la etapa de adquisición del espaciador.
Se requiere Cas4 para el procesamiento eficiente del preespaciador mediante la formación de un complejo Cas4- Cas1 - Cas2 . [1] En este complejo, Cas4 corta sustratos de doble cadena con largos salientes 3' a través de la escisión endonucleolítica específica del sitio. [2] Cas4 interactúa estrechamente con los sitios activos de integrasa de Cas1 , reconoce las secuencias PAM dentro del sustrato y se escinde con precisión aguas arriba de ellas, asegurando la adquisición de espaciadores funcionales. [2] [1]