Microscopía de campo oscuro
La microscopía de campo oscuro (también llamada microscopía de fondo oscuro ) describe métodos de microscopía , tanto en microscopía óptica como electrónica , que excluyen el haz no disperso de la imagen. Como resultado, el campo alrededor de la muestra (es decir, donde no hay una muestra para dispersar el haz) es generalmente oscuro.
En microscopios ópticos se debe utilizar una lente de condensador de campo oscuro, que dirige un cono de luz lejos de la lente del objetivo. Para maximizar el poder de recolección de luz dispersa de la lente del objetivo, se usa inmersión en aceite y la apertura numérica (NA) de la lente del objetivo debe ser menor que 1.0. Se pueden usar lentes de objetivo con un NA más alto, pero solo si tienen un diafragma ajustable, lo que reduce el NA. A menudo, estos objetivos tienen un NA que varía de 0,7 a 1,25. [1]
En microscopía óptica , el campo oscuro describe una técnica de iluminación utilizada para mejorar el contraste en muestras sin teñir . Funciona iluminando la muestra con luz que no será captada por la lente del objetivo y por tanto no formará parte de la imagen. Esto produce la apariencia clásica de un fondo oscuro, casi negro, con objetos brillantes.
La microscopía de campo oscuro es una técnica muy simple pero efectiva y muy adecuada para usos que involucran muestras biológicas vivas y no teñidas , como un frotis de un cultivo de tejidos o de organismos unicelulares individuales transmitidos por el agua. Teniendo en cuenta la simplicidad de la configuración, la calidad de las imágenes obtenidas con esta técnica es impresionante.
Una limitación de la microscopía de campo oscuro son los bajos niveles de luz que se ven en la imagen final. Esto significa que la muestra debe estar muy iluminada, lo que puede dañar la muestra.
Las técnicas de microscopía de campo oscuro están casi completamente libres de artefactos de estilo de halo o relieve típicos de la DIC y las imágenes de contraste de fase. Esto se produce a expensas de la sensibilidad a la información de fase.
