Hemocitómetro
El hemocitómetro (o hemocitómetro) es un dispositivo de cámara de recuento diseñado originalmente y generalmente utilizado para contar células sanguíneas . [1]
El hemocitómetro fue inventado por Louis-Charles Malassez y consiste en un portaobjetos de microscopio de vidrio grueso con una muesca rectangular que crea una cámara de volumen de precisión. Esta cámara está grabada con una rejilla de líneas perpendiculares grabada con láser . El dispositivo está cuidadosamente diseñado para que se conozca el área delimitada por las líneas y también se conozca la profundidad de la cámara. Por lo tanto, al observar un área definida de la cuadrícula, es posible contar el número de células o partículas en un volumen específico de líquido y, por lo tanto, calcular la concentración de células en el líquido en general. Un tipo de hemocitómetro muy utilizado es la cámara de recuento de Neubauer . [2]
Otros tipos de hemocitómetros con diferentes reglas se utilizan para diferentes aplicaciones. Las reglas de Fuchs-Rosenthal, comúnmente utilizadas para el recuento de líquido cefalorraquídeo, las reglas de Howard Mold que se usan para el moho en los alimentos y los productos de envasado de alimentos, las reglas de McMaster Egg Slide para contar huevos microbianos en la materia fecal, las reglas de la cámara Nageotte para contar los niveles bajos de glóbulos blancos en blanco componentes de plaquetas con células reducidas, regla de Palmer Nanoplancton para contar plankters más pequeños. El contador Petroff-Hausser que utiliza reglas de Neubauer mejoradas se utiliza para el recuento de bacterias y espermatozoides y se ofrece con distintas profundidades de cámara. La regla Sedgwick-Rafter Cell en un hemocitómetro está diseñada principalmente para su uso en la microscopía de agua potable.
El área cuadriculada del hemocitómetro mejorado de Neubauer reglado consta de nueve cuadrados de 1 x 1 mm (1 mm 2 ). Estos se subdividen en tres direcciones; 0,25 x 0,25 mm (0,0625 mm 2 ), 0,25 x 0,20 mm (0,05 mm 2 ) y 0,20 x 0,20 mm (0,04 mm 2 ). El cuadrado central se subdivide a su vez en cuadrados de 0,05 x 0,05 mm (0,0025 mm 2 ). Los bordes elevados del hemocitómetro sostienen el cubreobjetos a 0,1 mm de la cuadrícula marcada, dando a cada cuadrado un volumen definido (ver figura a la derecha). [3]
Para usar el hemocitómetro, primero asegúrese de que el cubreobjetos especial provisto con la cámara de conteo esté colocado correctamente en la superficie de la cámara de conteo. Cuando las dos superficies de vidrio están en contacto adecuado , se pueden observar los anillos de Newton . Si es así, la suspensión celular se aplica al borde del cubreobjetos para ser succionada al vacío por acción capilar que llena completamente la cámara con la muestra. El número de células en la cámara se puede determinar mediante recuento directo usando un microscopio , y las células visualmente distinguibles se pueden contar diferencialmente. El número de células en la cámara se utiliza para calcular la concentración o densidad de las células en la mezcla.de donde proviene la muestra. Es el número de células en la cámara dividido por el volumen de la cámara, que se conoce desde el principio, teniendo en cuenta las diluciones y los atajos de conteo:
