Las proteínas fluorescentes fotoactivables (PAFP) son un tipo de proteína fluorescente que exhibe una fluorescencia que puede modificarse mediante una reacción química inducida por la luz .
El primer PAFP, Kaede (proteína) , se aisló de Trachyphyllia geoffroyi en una biblioteca de cDNA diseñada para identificar nuevas proteínas fluorescentes. [1] Se descubrió por casualidad que una proteína verde fluorescente derivada de esta pantalla tiene sensibilidad a la luz ultravioleta:
Dejamos una de las alícuotas de proteína en la mesa del laboratorio durante la noche. Al día siguiente, encontramos que la muestra de proteína en el banco se había vuelto roja, mientras que las otras que estaban guardadas en una caja de papel permanecían verdes. Aunque el cielo estaba parcialmente nublado, la muestra roja había sido expuesta a la luz del sol a través de las ventanas orientadas al sur. [1]
Muchos PAFP se han diseñado a partir de proteínas fluorescentes existentes o se han identificado a partir de pantallas a gran escala a raíz del descubrimiento de Kaede. Muchos de estos se someten a una fotoconversión de verde a rojo, pero hay otros colores disponibles. Algunas proteínas participan en reacciones de fotoconversión irreversibles, mientras que otras reacciones se pueden revertir utilizando luz de una longitud de onda específica.
A diferencia de otras proteínas fluorescentes, las PAFP se pueden utilizar como marcadores ópticos selectivos. Se puede seguir una célula completamente marcada para evaluar la división celular, la migración y la morfología. Los volúmenes muy pequeños que contienen PAFP se pueden activar con un láser. En estos casos, se puede evaluar el tráfico, la difusión y el recambio de proteínas.