CFU-E son las siglas de Colony Forming Unit-Erythroid . [1] Surge de CFU-GEMM (a través de BFU-E, [2] que significa "unidades formadoras de ráfagas eritroides" [3] ) y da lugar a proeritroblastos .
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Ensayo de CFU-E murino
CFU-E es una etapa del desarrollo eritroide entre la etapa BFU-E y la etapa proeritroblasto. El ensayo de colonias CFU-E está diseñado para detectar cuántas unidades formadoras de colonias de linaje eritroide hay en un tejido hematopoyético (médula ósea, bazo o hígado fetal), que puede reflejar la demanda del organismo de suministro de oxígeno a los tejidos. o un trastorno hematopoyético.
Los progenitores eritroides tempranos se encuentran con una frecuencia bastante baja en relación con las etapas posteriores de la diferenciación eritroide, como las etapas pro-eritroblasto y eritroblasto basófilo que pueden detectarse mediante citometría de flujo directamente ex vivo ( Socolovsky, M; Nam, H; Fleming, MD; Haase, VH; Brugnara, C; Lodish, HF (diciembre de 2001). "Eritropoyesis ineficaz en ratones Stat5a (- / -) 5b (- / -) debido a la disminución de la supervivencia de los eritroblastos tempranos" . Blood . 98 : 3261– 73. doi : 10.1182 / blood.v98.12.3261 . PMID 11719363 .). Además, a diferencia del pro-eritroblasto y las etapas posteriores del desarrollo del eritroide, no existen marcadores de citometría de flujo positivos verdaderamente confiables y únicos, aunque es posible usar marcadores de exclusión negativos para agotar una población celular de otros precursores y células diferenciadas mediante clasificación celular. , enriqueciéndolo así enormemente para la actividad CFU-E (Aislamiento prospectivo y análisis de expresión génica global de la unidad formadora de colonias de eritrocitos, Terszowski G. et al. Blood 2005). Las células CFU-E expresan el receptor Epo, c-Kit (receptor del factor de células madre), receptor de transferrina (CD71 +) y son negativas para Ter119 (antígeno asociado a glucoforina A). Por las razones anteriores, el ensayo CFU-E, tan ineficaz y variable como a menudo puede ser, todavía se utiliza en la actualidad.
Las células en la etapa CFU-E expresan algún receptor de eritropoyetina (EpoR) y, por lo tanto, pueden inducirse a diferenciarse terminalmente in vitro en 2-3 días en presencia de solo eritropoyetina (Epo) (junto con el contenido básico de los medios de cultivo: FBS , BSA en IMDM). La metilcelulosa es un aditivo de medios semisólidos que permite a un investigador teñir (con reactivo de diaminobencidina para hemoglobina) y luego contar colonias individuales, cada una derivada de un progenitor en placa única que se encuentra en la etapa CFU-E. Para el día 2 desde el momento de la siembra en placa, cada colonia de CFU-E contendrá entre 8 (mínimo) y 64 células hemoglobinizadas, la mayoría de las cuales se encuentran en su etapa final de diferenciación eritroide. Es posible ver un pequeño espectro del nivel de hemoglobinización y posiblemente el tamaño de las células, lo que indica que algunas células de la colonia han alcanzado la etapa final más rápido que otras.
El número de células en una colonia es importante porque la etapa pro-eritroblasto también responde a Epo (expresa el receptor de Epo), pero la capacidad proliferativa de estas células no es tan alta, lo que produce una colonia con menos de 8 células. Del mismo modo, una etapa anterior de diferenciación eritroide también puede producir colonias en medio solo de Epo, pero estas colonias probablemente serían más pequeñas y / o no estarían hemoglobinizadas, ya que las etapas antes de la etapa CFU-E (MEP y BFU-E) requieren otros factores. (IL-3, etc.) y más tiempo de crecimiento que también retrasará la diferenciación terminal y la hemoglobinización.
Referencias
- ^ Miller, Cindy L .; Dykstra, Brad; Aleros, Connie J. (2008). "Caracterización de células madre y progenitoras hematopoyéticas de ratón". Protocolos actuales en inmunología . 80 (1): 22B.2.1–22B.2.31. doi : 10.1002 / 0471142735.im22b02s80 . ISSN 1934-368X . PMID 18432636 .
- ^ Wu H, Liu X, Jaenisch R, Lodish HF (octubre de 1995). "La generación de progenitores eritroides BFU-E y CFU-E comprometidos no requiere eritropoyetina o el receptor de eritropoyetina". Celular . 83 (1): 59–67. doi : 10.1016 / 0092-8674 (95) 90234-1 . PMID 7553874 .
- ^ Marley SB, Lewis JL, Goldman JM, Gordon MY (junio de 1996). "Cinética anormal de la formación de colonias por unidades formadoras de ráfagas eritroides (BFU-E) en la leucemia mieloide crónica". Br. J. Haematol . 93 (4): 878–83. doi : 10.1046 / j.1365-2141.1996.d01-1738.x . PMID 8703820 .
enlaces externos
- CFU-E en los encabezados de temas médicos (MeSH) de la Biblioteca Nacional de Medicina de EE. UU .