Ficoll es un polisacárido hidrófilo neutro, altamente ramificado y de gran masa que se disuelve fácilmente en soluciones acuosas . Los radios de Ficoll oscilan entre 2 y 7 nm. Se prepara por reacción del polisacárido con epiclorhidrina . Ficoll es una marca registrada propiedad de las empresas de GE Healthcare. [1]
Ficoll es parte de Ficoll-Paque, que se utiliza en los laboratorios de biología para separar la sangre de sus componentes ( eritrocitos , leucocitos , etc.). Ficoll-Paque normalmente se coloca en la parte inferior de un tubo cónico, y luego la sangre se coloca lentamente sobre Ficoll-Paque. Después de ser centrifugado , las siguientes capas serán visibles en el tubo cónico, de arriba a abajo: plasma y otros componentes, una capa de células mononucleares llamada capa leucocitaria ( PBMC / MNC), Ficoll-Paque, y eritrocitos y granulocitos que debe estar presente en forma de gránulos. Esta separación permite una fácil recolección de PBMC. Tenga en cuenta que algunos glóbulos rojosel atrapamiento (presencia de eritrocitos y granulocitos) puede ocurrir en la capa de PBMC o Ficoll-Paque. A veces puede ocurrir una coagulación sanguínea importante en la capa de PBMC. El tetraacetato de etilendiamina ( EDTA ) y la heparina se usan comúnmente junto con Ficoll-Paque (TM) para prevenir la coagulación y se usa como separador de células mononucleares.
En un momento, bastante temprano en la investigación para el tratamiento de la diabetes por trasplante, Ficoll se utilizó en un intento de separar los islotes de Langerhans del tejido pancreático humano digerido con enzimas (colagenasa). La teoría era que los islotes separados podrían usarse para trasplantes en pacientes con diabetes tipo 1 . En la práctica, el uso de Ficoll condujo a dificultades para obtener una preparación de islotes lo suficientemente pura, con suficiente recuperación de islotes del tejido original, para un trasplante de islotes seguro y eficaz en humanos.
Debido a que la estratificación de Ficoll-Paque es un proceso muy lento, se han desarrollado dispositivos que ayudan en el paso más lento, la superposición. Uno de estos productos es SepMate-50, [2] un tubo especializado que contiene un inserto poroso que forma una barrera física entre el Ficoll-Paque y la muestra de sangre. Esto permite que la muestra de sangre se pipetee rápidamente en el inserto, evitando la necesidad de superponerla directamente sobre Ficoll-Paque. El inserto SepMate también reduce la duración del paso de centrifugación y, después de la centrifugación, la capa superior que contiene plasma y PBMC se puede verter en un nuevo tubo. [3] Otros dispositivos incluyen una columna que contiene una barrera porosa de polietileno de alta densidad o "frita". Estos productos permiten que la sangre se coloque en capas mucho más rápidamente sin mezclar polisacáridos y sangre. Un ejemplo de tal producto es el "Accuspin System Histopaque-1077" vendido por Sigma Aldrich. El costo de este producto es significativamente más alto que los productos básicos Ficoll y Ficoll-Paque. También es posible tener el sistema de separación Ficoll-Paque incluido en el Vacutainer utilizado para recolectar la sangre. Dichos Vacutainer aumentan la conveniencia y seguridad de recolectar hemoderivados, pero cuestan 50 veces más que el Vacutainer básico.
Ver también
- Ficoll en la wiki de Life Scientist OpenWetWare
Notas
- ^ "Ficoll" . Oficina de Patentes y Marcas de Estados Unidos . Consultado el 15 de febrero de 2007 .
- ^ SepMate ™ -50
- ^ http://www.sepmate.com . Consultado el 25 de septiembre de 2012.