Matriz de tejido congelado
La matriz de tejido congelado consta de tejidos frescos congelados en los que se ensamblan hasta 50 núcleos de tejido separados en forma de matriz para permitir el análisis histológico simultáneo .
La matriz de tejido de parafina se desarrolló durante los últimos años de la década de 1980; esta matriz puede ayudar a los científicos a analizar de alto rendimiento las expresiones de genes y proteínas en múltiples muestras de tejido , especialmente analizar diferentes niveles de proteínas con anticuerpos mediante inmunohistoquímica. Varias matrices de tejidos de parafina están ahora disponibles comercialmente de muchas empresas de biotecnología. La mayoría de las matrices se pueden hacer fácilmente mediante un instrumento de micromatrices (Beecher Instruments Inc.). Sin embargo, los tejidos incluidos en parafina tienen limitaciones. Las soluciones tamponadas de formalina entrecruzan proteínas y ácidos nucleicos cuando se utilizan para fijar tejidos. El ADN, el ARN y las proteínas de los tejidos se dañan en varios niveles durante la fijación. Por tanto, muchos resultados experimentales científicos de tejidos fijados con formalina no son fiables. Dado que las secciones de tejido congeladas no pasan por ningún procedimiento de fijación y, por lo tanto, el ADN, el ARN y la proteína en los tejidos congelados conservan sus características nativas mucho más que en los tejidos embebidos en parafina.Los científicos que han estado desarrollando anticuerpos con fines terapéuticos necesitan todos los resultados preliminares de los tejidos congelados para obtener la aprobación de la FDA. En consecuencia, la matriz de tejido congelado debería ser la mejor herramienta para análisis de alto rendimiento con este propósito.
Los núcleos de tejido congelado con 2 mm de diámetro de las regiones de interés se extraen de los bloques de OCT de tejido congelado a diferentes temperaturas de congelación, ya que cada tipo de tejido tiene su propia preferencia de temperatura en la etapa de congelación. Luego, todos los núcleos de tejido congelado se insertan en un bloque congelado de OCT receptor en un patrón de matriz espaciado con precisión. Las secciones de este bloque se cortan usando un criostato, se montan en un portaobjetos de microscopio y luego se analizan mediante cualquier método de análisis histológico estándar. Cada bloque de matriz de tejido congelado se puede cortar en 100 a 500 secciones, que se pueden someter a pruebas independientes. Las pruebas comúnmente empleadas en una matriz de tejido congelado incluyen inmunohistoquímica e hibridación in situ.
