inmunoensayo


Un inmunoensayo ( IA ) es una prueba bioquímica que mide la presencia o concentración de una macromolécula o una molécula pequeña en una solución mediante el uso de un anticuerpo (generalmente) o un antígeno (a veces). La molécula detectada por el inmunoensayo se suele denominar " analito " y en muchos casos es una proteína , aunque pueden ser otro tipo de moléculas, de diferentes tamaños y tipos, siempre que los anticuerpos adecuados que tengan las propiedades requeridas para se desarrolla el ensayo. Analitos en líquidos biológicos como suero u orinase miden con frecuencia mediante inmunoensayos con fines médicos y de investigación. [1]

Los inmunoensayos vienen en muchos formatos y variaciones diferentes. Los inmunoensayos se pueden ejecutar en múltiples pasos con reactivos que se agregan y se lavan o separan en diferentes puntos del ensayo. Los ensayos de varios pasos a menudo se denominan inmunoensayos de separación o inmunoensayos heterogéneos. Algunos inmunoensayos se pueden realizar simplemente mezclando los reactivos y la muestra y realizando una medición física. Dichos ensayos se denominan inmunoensayos homogéneos o, con menos frecuencia, inmunoensayos sin separación.

El uso de un calibrador se emplea a menudo en inmunoensayos. Los calibradores son soluciones que se sabe que contienen el analito en cuestión, y la concentración de ese analito generalmente se conoce. La comparación de la respuesta de un ensayo a una muestra real con la respuesta del ensayo producida por los calibradores permite interpretar la intensidad de la señal en términos de presencia o concentración de analito en la muestra.

Los inmunoensayos se basan en la capacidad de un anticuerpo para reconocer y unirse a una macromolécula específica en lo que podría ser una mezcla compleja de macromoléculas. En inmunología, la macromolécula particular unida por un anticuerpo se denomina antígeno y el área de un antígeno a la que se une el anticuerpo se denomina epítopo .

En algunos casos, un inmunoensayo puede usar un antígeno para detectar la presencia de anticuerpos, que reconocen ese antígeno, en una solución. En otras palabras, en algunos inmunoensayos, el analito puede ser un anticuerpo en lugar de un antígeno.

Además de la unión de un anticuerpo a su antígeno, la otra característica clave de todos los inmunoensayos es un medio para producir una señal medible en respuesta a la unión. La mayoría de los inmunoensayos, aunque no todos, implican la unión química de anticuerpos o antígenos con algún tipo de marca detectable. Existe una gran cantidad de etiquetas en los inmunoensayos modernos y permiten la detección a través de diferentes medios. Muchos marcadores son detectables porque emiten radiación, producen un cambio de color en una solución, emiten fluorescencia bajo la luz o pueden ser inducidos a emitir luz.


Un sándwich ELISA ejecutado en una placa de microtitulación.
En un inmunoensayo homogéneo competitivo, el analito no marcado desplaza al analito marcado unido, que luego se detecta o mide.
Los inmunoensayos no competitivos de dos sitios generalmente consisten en un analito "intercalado" entre dos anticuerpos. Los ELISA a menudo se ejecutan en este formato