Un osmómetro de nanolitros Clifton es un dispositivo que permite la determinación del punto de fusión y congelación de una solución acuosa utilizando un tamaño de muestra de solo nanolitros. El dispositivo consta de una caja de control, una etapa de enfriamiento y un portamuestras. Además, se requieren varias jeringas de microlitros , aceites de inmersión y microscopios para su uso.
El enfriamiento de la etapa se logra con el uso de dispositivos Peltier dentro de la etapa de enfriamiento.
El osmómetro de nanolitros Clifton es especialmente adecuado para determinar la actividad anticongelante o histéresis térmica de una solución, que es una diferencia en el punto de fusión y congelación de una solución. Este fenómeno surge cuando las proteínas anticongelantes biológicas están presentes en una solución. Las soluciones que no contienen proteínas anticongelantes generalmente tienen puntos de congelación y fusión idénticos.
Operación
La determinación del punto de fusión y congelación consta de los siguientes pasos:
- Calibración : el dispositivo debe calibrarse con soluciones de osmolaridad conocida , normalmente se utiliza una calibración de 2 puntos.
- Carga : Cada uno de los pocillos del portamuestras se llena con un aceite de inmersión "pesado". Se pipetea o sopla una pequeña cantidad (generalmente 1-2 nL) de solución en el aceite de los pozos utilizando una jeringa de microlitro o un tubo capilar extraído.
- Deep Freeze : La platina se enfría a una temperatura de alrededor de -40 grados Celsius (-40 ° F) muy rápidamente (~ 20 segundos), lo que hace que las muestras en los pocillos de muestras se congelen instantáneamente.
- Determinaciones : Se permite que las muestras se fundan relativamente lentamente, bajo el control del controlador del osmómetro. La temperatura de la muestra ( solución ) en el punto en que desaparece el último cristal de hielo se llama punto de fusión . Las muestras se vuelven a congelar utilizando el ultracongelador y una vez más se funden para formar un solo cristal de hielo. Cuando solo queda un cristal de hielo muy pequeño, las muestras se enfrían de manera controlada utilizando la caja de control de nanolitros. La temperatura de la solución en el punto en que crece el cristal de hielo se llama punto de congelación .
Usos del osmómetro de nanolitros de Clifton
Se puede utilizar para determinar la osmolaridad (salinidad) de volúmenes muy pequeños de soluciones acuosas como lágrimas, muestras biológicas o fluidos vegetales. También se puede utilizar para determinar la actividad anticongelante o histéresis térmica en una solución, como fluidos de peces polares, insectos que hibernan, plantas resistentes al frío, cualquier fluido que contenga proteínas anticongelantes .