Inmersión en aceite
En microscopía óptica , la inmersión en aceite es una técnica utilizada para aumentar el poder de resolución de un microscopio . Esto se logra sumergiendo tanto la lente del objetivo como la muestra en un aceite transparente de alto índice de refracción , aumentando así la apertura numérica de la lente del objetivo.
Sin aceite, las ondas de luz se reflejan en la muestra de portaobjetos a través del cubreobjetos de vidrio, a través del aire y hacia la lente del microscopio (consulte la figura coloreada a la derecha). A menos que una onda salga en un ángulo de 90 grados, se dobla cuando golpea una nueva sustancia, la cantidad de curvatura depende del ángulo. Esto distorsiona la imagen. El aire tiene un índice de refracción muy diferente al del vidrio, lo que lo convierte en una curva más grande en comparación con el aceite, que tiene un índice más similar al del vidrio. El aceite fabricado especialmente puede tener casi exactamente el mismo índice de refracción que el vidrio, lo que hace que una lente sumergida en aceite sea casi tan efectiva como tener completamente vidrio en la muestra (lo que no sería práctico).
Los aceites de inmersión son aceites transparentes que tienen características ópticas y de viscosidad específicas necesarias para su uso en microscopía. Los aceites típicos utilizados tienen un índice de refracción de alrededor de 1,515. [1] Un objetivo de inmersión en aceite es una lente de objetivo especialmente diseñada para usarse de esta manera. Muchos condensadores también brindan una resolución óptima cuando la lente del condensador se sumerge en aceite.
Las lentes reconstruyen la luz dispersada por un objeto. Para lograr con éxito este fin, idealmente, se deben recopilar todas las órdenes de difracción. Esto está relacionado con el ángulo de apertura de la lente y su índice de refracción. La resolución de un microscopio se define como la separación mínima necesaria entre dos objetos examinados para que el microscopio los distinga como objetos separados. Esta distancia mínima está etiquetada como δ. Si dos objetos están separados por una distancia menor que δ, aparecerán como un solo objeto en el microscopio.
donde λ es la longitud de onda de la luz. A partir de esto, queda claro que una buena resolución (δ pequeña) está relacionada con una alta apertura numérica.
donde α 0 es la mitad del ángulo que abarca la lente del objetivo visto desde la muestra, yn es el índice de refracción del medio entre la lente y la muestra (≈1 para el aire).
