Los plásmidos pGreen se describieron por primera vez en 2000 como componentes de un nuevo sistema binario de T-DNA . [1] La página web de apoyo [2] proporciona información complementaria y apoyo continuo a los investigadores para solicitar sus recursos de plásmidos. Como estos plásmidos han sido adoptados por la comunidad de investigadores, los plásmidos se han desarrollado, ampliando los recursos disponibles para la comunidad.
Se anima a los investigadores a contribuir a esta comunidad de investigación enviando su secuencia de vector a genbank y proporcionando una descripción del plásmido en el sitio.
pGreenI y pGreenII
pGreen es el plásmido pGreen original.
pGreenII presenta una modificación del esqueleto del plásmido para mejorar la estabilidad del plásmido.
Regiones de T-DNA
Sin selección de transformación
pGreenII 0000 : ADN-T mínimo con borde izquierdo y derecho, gen lacZ para selección azul / blanco durante la clonación, sitio de clonación múltiple derivado de pBluescript
pGreenII 62-SK : derivado de pGreenII 0000, la selección de clonación Lac Z azul / blanco se ha reemplazado por un casete 35S- MCS - CaMV que permite la inserción de un gen de interés en un casete de sobreexpresión 35S. El sitio de clonación múltiple (MCS) se deriva de pBluescript .
Selección de kanamicina
pGreenII 0029 : derivado de pGreenII 0000, se ha insertado un casete nos-kan en el sitio Hpa I del borde izquierdo, que proporciona resistencia a la kanamicina durante la selección de transformación de la planta.
pGreenII 0029 62-SK : derivado de pGreenII 0029, la selección de clonación Lac Z azul / blanco se ha reemplazado por un casete 35S-MCS-CaMV que permite la inserción de un gen de interés en un casete de sobreexpresión 35S. El MCS se deriva de pBluescript.
Selección de higromicina
pGreenII 0179 : derivado de pGreenII 0000, se ha insertado un casete 35S-hyg en el sitio Hpa I del borde izquierdo, lo que proporciona resistencia a la higromicina durante la selección de transformación de la planta.
Selección de bialafos
pGreenII 0229 : derivado de pGreenII 0000, se ha insertado un casete nos-bar en el sitio Hpa I del borde izquierdo, que proporciona resistencia a bialafos o fosfinotricina durante la selección de transformación de plantas. [3]
pGreenII 0229 62-SK : derivado de pGreenII 0229, la selección de clonación Lac Z azul / blanco se ha reemplazado por un casete 35S-MCS-CaMV que permite la inserción de un gen de interés en un casete de sobreexpresión 35S. El MCS se deriva de pBluescript.
pSoup
Este es el plásmido auxiliar que proporciona la función replicasa para el origen de replicación pSa de pGreen. pSoup es resistente a la tetraciclina y un grupo de incompatibilidad complementario de modo que puede coexistir con pGreen en la célula de Agrobacterium .
pSoup : el plásmido de ayuda original de pGreen. pGreen no se replicará en Agrobacterium si no está presente.
Referencias
- ^ "pGreen: un vector Ti binario versátil y flexible para la transformación de plantas mediada por Agrobacterium", Plant Molecular Biology 42: 819-832, 2000
- ^ "www.pGreen.ac.uk" . Archivado desde el original el 25 de julio de 2017 . Consultado el 13 de febrero de 2020 .
- ^ "selección de bialafos" .