La proteína roja fluorescente ( RFP ) es un fluoróforo que emite fluorescencia rojo-naranja cuando se excita. Se han desarrollado varias variantes usando mutagénesis dirigida . [1] El original se aisló de Discosoma y se denominó DsRed . Ahora hay otros disponibles que emiten fluorescencia en naranja, rojo y rojo lejano. [2]
| Proteína roja fluorescente drFP583 | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Identificadores | ||||||
| Organismo | ||||||
| Símbolo | ? | |||||
| UniProt | Q9U6Y8 | |||||
| ||||||
La RFP es de aproximadamente 25,9 kDa. El máximo de excitación es de 558 nm y el máximo de emisión es de 583 nm. [3]
La primera proteína fluorescente que se descubrió, la proteína verde fluorescente (GFP), se ha adaptado para identificar y desarrollar marcadores fluorescentes en otros colores. En Anthozoa se descubrieron variantes como la proteína fluorescente amarilla (YFP) y la proteína fluorescente cian (CFP) . [4]
Los problemas con las proteínas fluorescentes incluyen el tiempo que transcurre entre la síntesis de proteínas y la expresión de la fluorescencia. DsRed tiene un tiempo de maduración de alrededor de 24 horas, [1] lo que puede hacer que sea inutilizable para muchos experimentos que tienen lugar en un período de tiempo más corto. Además, DsRed existe en forma tetramérica, lo que puede afectar la función de las proteínas a las que está unido. La ingeniería genética ha mejorado la utilidad de la RFP al aumentar la velocidad del desarrollo fluorescente y crear variantes monoméricas. [3] [4] Las variantes mejoradas de RFP incluyen mFruits (mCherry, mOrange, mRaspberry), mKO, TagRFP, mKate, mRuby, FusionRed, mScarlet y DsRed-Express. [4] [5]
Se ha demostrado que DsRed es más adecuado para enfoques de imágenes ópticas que EGFP . [6]
Referencias
- ^ a b Bevis, Brooke J .; Glick, Benjamin S. (2002). "Variantes de maduración rápida de la proteína fluorescente roja Discosoma (DsRed)". Biotecnología de la naturaleza . 20 (1): 83–87. doi : 10.1038 / nbt0102-83 . ISSN 1546-1696 . PMID 11753367 .
- ^ Miyawaki, Atsushi; Shcherbakova, Daria M; Verkhusha, Vladislav V (octubre de 2012). "Proteínas rojas fluorescentes: formación de cromóforos y aplicaciones celulares" . Opinión actual en biología estructural . 22 (5): 679–688. doi : 10.1016 / j.sbi.2012.09.002 . ISSN 0959-440X . PMC 3737244 . PMID 23000031 .
- ^ a b Remington, S. James (1 de enero de 2002). "Negociar los topes de velocidad a la fluorescencia". Biotecnología de la naturaleza . 20 (1): 28-29. doi : 10.1038 / nbt0102-28 . PMID 11753356 .
- ^ a b c Piatkevich, Kiryl D .; Verkhusha, Vladislav V. (2011). "Guía de biosensores y proteínas fluorescentes rojas para citometría de flujo" . Métodos en biología celular . 102 : 431–461. doi : 10.1016 / B978-0-12-374912-3.00017-1 . ISBN 9780123749123. ISSN 0091-679X . PMC 3987785 . PMID 21704849 .
- ^ Bindels, Daphne S; Haarbosch, Lindsay (2017). "mScarlet: una proteína fluorescente roja monomérica brillante para imágenes celulares". Métodos de la naturaleza . 14 (1): 53–56. doi : 10.1038 / nmeth.4074 . ISSN 1548-7105 . PMID 27869816 .
- ^ Böhm I, Gehrke S, Kleb B, Hungerbühler M, Müller R, Klose KJ, Alfke H (2019). "Monitorización de la carga tumoral in vivo por imagen óptica en un modelo de ratón SCID de xenoinjerto: evaluación de dos proteínas fluorescentes de la superfamilia GFP". Acta Radiol . 60 (3): 315–326. doi : 10.1177 / 0284185118780896 . PMID 29890843 .
enlaces externos
- DsRed en FPBase
