Sephadex es un reticulado de dextrano gel utilizado para la filtración en gel . Fue lanzado por Pharmacia en 1959, después del trabajo de desarrollo de Jerker Porath y Per Flodin . [1] [2] El nombre se deriva de SE paration Pha rmacia dex tran. Normalmente se fabrica en forma de perlas y se usa más comúnmente para columnas de filtración en gel . Variando el grado de reticulación, se pueden alterar las propiedades de fraccionamiento del gel.
Estos medios cromatográficos y de filtración en gel altamente especializados están compuestos de perlas macroscópicas derivadas sintéticamente del polisacárido dextrano. Las cadenas orgánicas están reticuladas para dar una red tridimensional que tiene grupos iónicos funcionales unidos por enlaces éter a unidades de glucosa de las cadenas de polisacáridos.
Las formas disponibles incluyen intercambiadores de aniones y cationes, así como resinas de filtración en gel, con diversos grados de porosidad; los tamaños de las perlas caen en rangos discretos entre 20 y 300 µm .
Sephadex también se utiliza para cromatografía de intercambio iónico. [3]
Aplicaciones
Sephadex se utiliza para separar moléculas por peso molecular. Sephadex es una alternativa más rápida a la diálisis (desalado), que requiere un factor de dilución bajo (tan solo 1,4: 1), con recuperaciones de alta actividad. Sephadex también se utiliza para el intercambio de tampones y la eliminación de moléculas pequeñas durante la preparación de biomoléculas grandes, como anfolitos, detergentes, marcadores radiactivos o fluorescentes y fenol (durante la purificación del ADN).
Una forma especial hidroxipropilada [4] de resina Sephadex, denominada Sephadex LH-20, se utiliza para la separación y purificación de pequeñas moléculas orgánicas como esteroides, terpenoides y lípidos. Un ejemplo de uso es la depuración del colesterol. [5]
Fraccionamiento
Cromatografía de exclusión.
Intervalo de fraccionamiento [6] de proteínas globulares y dextranos (Da).
Tipo de gel | Rango de fraccionamiento | |
---|---|---|
Globular Proteínas | Dextranos | |
G-10 | ≤700 | ≤700 |
G-15 | ≤1500 | ≤1500 |
G-25 | 1000–5000 | 100–5.000 |
G-50 | 1500–30 000 | 500–10 000 |
G-75 | 3000–80 000 | 1000–50 000 |
G-75 SF | 3000–70 000 | 1000–50 000 |
G-100 | 4000-150 000 | 1000-100 000 |
G-100 SF | 4000–100 000 | 1000-100 000 |
G-150 | 5000–300 000 | 1000-150 000 |
G-150 SF | 5000-150 000 | 1000-150 000 |
G-200 | 5000–600 000 | 1000-200 000 |
G-200 SF | 5000–250 000 | 1000-200 000 |
Cromatografía de intercambio de iones.
Descripción | Funcionalidad | Tamaño de la perla (µ) |
---|---|---|
Sephadex-CM C-25 | carboximetilo | 40-120 |
Sephadex-CM C-50 | carboximetilo | 40-120 |
Sephadex-DEAE A-25 | 2- (dietilamino) etilo | 40-120 |
Sephadex-DEAE A-50 | 2- (dietilamino) etilo | 40-120 |
Sephadex-QAE A-25 | aminoetilo cuaternario | 40-120 |
Sephadex-QAE A-50 | aminoetilo cuaternario | 40-120 |
Sephadex-SP C-25 | sulfopropilo | 40-120 |
Sephadex-SP C-50 | sulfopropilo | 40-120 |
Ver también
Referencias
- ^ "De Sephadex a GE Healthcare" . chemeurope.com . Archivado desde el original el 31 de julio de 2012 . Consultado el 2 de enero de 2019 .
- ^ Porath, J; Flodin, P (1959). "Filtración en gel: un método de desalación y separación de grupos". Naturaleza . 183 (4676): 1657–1659. Código Bibliográfico : 1959Natur.183.1657P . doi : 10.1038 / 1831657a0 . ISSN 1476-4687 . PMID 13666849 . S2CID 32287460 .
- ^ "Medios de intercambio iónico Sephadex®" (PDF) . chembio.uoguelph.ca . Pharmacia Biotech.
- ^ GE Healthcare. "Sephadex LH-20" . Consultado el 6 de diciembre de 2019 .
- ^ Hanukoglu I, Jefcoate CR (1980). "Separación de pregnenolona del colesterol usando minicolumnas Sephadex LH-20" . Journal of Chromatography A . 190 (1): 256–262. doi : 10.1016 / S0021-9673 (00) 85545-4 . ISSN 0021-9673 .
- ^ "Instrucciones para Sephadex Media" (PDF) . gelifesciences.co.jp (manual del producto). GE Healthcare. 7 de abril de 2008 . Consultado el 2 de enero de 2019 .