Coeficiente síncrono de alteración de la resistencia


El coeficiente de alteración de arrastre síncrono ( SCODA ) es un método biotecnológico para purificar, separar y / o concentrar biomoléculas. SCODA tiene la capacidad de separar moléculas cuya movilidad (o arrastre) se puede alterar en sincronía con un campo de conducción. Esta técnica se ha utilizado principalmente para concentrar y purificar ADN , donde la movilidad del ADN cambia con un campo electroforético aplicado . [1] [2] [3] También se ha demostrado SCODA electroforético con ARN y proteínas .

Como se muestra a continuación, el principio SCODA se aplica a cualquier partícula impulsada por un campo de fuerza en el que la movilidad de la partícula se altera en sincronía con el campo impulsor.

Para fines explicativos, considere una partícula electroforética que se mueve (impulsa) en un campo eléctrico. Dejar:

y

denotar un campo eléctrico y la velocidad de la partícula en dicho campo. Si es constante el promedio de tiempo de .

Si no es constante en función del tiempo y si tiene un componente de frecuencia proporcional al tiempo promedio de no necesita ser cero.


Secuencia de lapso de tiempo que muestra el ADN de pUC19 teñido con SYBR Green I (2,7 kb) siendo SCODA concentrado en el centro de un gel de agarosa al 1% (donde no hay electrodo presente).
Concentración de ADN SCODA utilizando el sistema Aurora. A - inyección de muestra de ADN. B, C, D - purificación de muestra de ADN. En la imagen D, el ADN alcanza una posición de equilibrio entre la fuerza de concentración de SCODA y el campo de lavado de CC. Muestra de ADN enfocada en E lista para ser pipeteada desde el pozo de extracción central.
A: muestra muy contaminada antes de inyectarse en el gel SCODA. B - Gel SCODA después de la inyección. Gel C - SCODA durante el proceso de purificación. D - Gel SCODA al final del proceso de purificación (sin contaminantes visibles). E - Imagen fluorescente del gel SCODA de la imagen D que muestra el ADN teñido en el centro del gel SCODA.
El ADN mutante (verde) se está separando del ADN de tipo salvaje (rojo) durante el SCODA específico de secuencia.