tripsinización


La tripsinización es el proceso de disociación celular que utiliza la tripsina , una enzima proteolítica que descompone las proteínas, para disociar las células adherentes del recipiente en el que se cultivan. Cuando se agrega a un cultivo celular, la tripsina descompone las proteínas que permiten que las células se adhieran al vaso. La tripsinización se usa a menudo para pasar células a un nuevo recipiente. Cuando se complete el proceso de tripsinización, las células estarán en suspensión y aparecerán redondeadas.

Con fines experimentales, las células a menudo se cultivan en recipientes que adoptan la forma de matraces o placas de plástico. En tales matraces, se proporciona a las células un medio de cultivo que comprende los nutrientes esenciales necesarios para la proliferación, y las células se adhieren al recipiente y entre sí a medida que crecen.

Este proceso de cultivo celular o cultivo de tejidos requiere un método para disociar las células del recipiente y entre sí. La tripsina, una enzima que se encuentra comúnmente en el tracto digestivo , se puede utilizar para "digerir" las proteínas que facilitan la adhesión al recipiente y entre las células.

Una vez que las células se han desprendido de su contenedor, es necesario desactivar la tripsina, a menos que la tripsina sea sintética, ya que las proteínas de la superficie celular también se escindirán con el tiempo y esto afectará el funcionamiento celular. [1] La tripsina es inhibida por el suero que proporciona los cationes divalentes como el calcio y el magnesio, que desempeña un papel en el proceso de señalización intracelular e intercelular, es decir, en la formación de CAM, por lo que el suero generalmente se agrega al recipiente una vez que las células se han desprendido; esto se puede confirmar por observación al microscopio.

La tripsinización se realiza a menudo para permitir el paso de las células a un nuevo recipiente, la observación para la experimentación o la reducción del grado de confluencia en el matraz mediante la eliminación de un porcentaje de las células.