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Colocación de tubos de muestras biológicas en nitrógeno líquido.
Las muestras conservadas criogénicamente se extraen de un Dewar de nitrógeno líquido .

La crioconservación o crioconservación es un proceso en el que los orgánulos , células , tejidos , matriz extracelular , órganos o cualquier otra construcción biológica susceptible al daño causado por la cinética química no regulada se conservan mediante enfriamiento a temperaturas muy bajas [1] (típicamente -80 ° C usando dióxido de carbono sólido o -196 ° C usando nitrógeno líquido ). A temperaturas suficientemente bajas, cualquier enzimáticoo se detiene efectivamente la actividad química que pueda causar daño al material biológico en cuestión. Los métodos de crioconservación buscan alcanzar bajas temperaturas sin causar daño adicional causado por la formación de cristales de hielo durante la congelación. La criopreservación tradicional se ha basado en recubrir el material a congelar con una clase de moléculas denominadas crioprotectores . Se están investigando nuevos métodos debido a la toxicidad inherente de muchos crioprotectores. [2] La crioconservación de los recursos zoogenéticos se realiza con la intención de conservar la raza.

Criopreservación natural [ editar ]

Los osos de agua ( Tardigrada ), organismos multicelulares microscópicos, pueden sobrevivir a la congelación reemplazando la mayor parte de su agua interna con el azúcar trehalosa , evitando su cristalización que de otra manera daña las membranas celulares.. Las mezclas de solutos pueden lograr efectos similares. Algunos solutos, incluidas las sales, tienen la desventaja de que pueden ser tóxicos en concentraciones intensas. Además del oso de agua, las ranas de madera pueden tolerar la congelación de su sangre y otros tejidos. La urea se acumula en los tejidos en preparación para la hibernación y el glucógeno hepático se convierte en grandes cantidades en glucosa en respuesta a la formación de hielo interno. Tanto la urea como la glucosa actúan como "crioprotectores" para limitar la cantidad de hielo que se forma y reducir la contracción osmótica de las células. Las ranas pueden sobrevivir a muchos eventos de congelación / descongelación durante el invierno si no se congela más del 65% del agua corporal total. La investigación que explora el fenómeno de las "ranas congeladas" ha sido realizada principalmente por el investigador canadiense, Dr. Kenneth B.Piso. [ cita requerida ]

La tolerancia a la congelación , en la que los organismos sobreviven al invierno congelando sólidos y cesando las funciones vitales, se conoce en unos pocos vertebrados: cinco especies de ranas ( Rana sylvatica , Pseudacris triseriata , Hyla crucifer , Hyla versicolor , Hyla chrysoscelis ), una de las salamandras ( Salamandrella). keyserlingii ), una de serpientes ( Thamnophis sirtalis ) y tres de tortugas ( Chrysemys picta , Terrapene carolina , Terrapene ornata ). [3] Tortugas mordedoras Chelydra serpentina y lagartijas Podarcis muralistambién sobrevive a la congelación nominal, pero no se ha establecido que sea adaptable para el invierno. En el caso de Rana sylvatica, un crioconservante es la glucosa ordinaria, cuya concentración aumenta en aproximadamente 19 mmol / l cuando las ranas se enfrían lentamente. [3]

Historia [ editar ]

Ver también: Criónica § Historia

Uno de los primeros teóricos de la criopreservación fue James Lovelock . En 1953, sugirió que el daño a los glóbulos rojos durante la congelación se debía al estrés osmótico , [4] y que el aumento de la concentración de sal en una célula que se deshidrata podría dañarla. [5] [6] A mediados de la década de 1950, experimentó con la criopreservación de roedores, determinando que los hámsteres podían congelarse con el 60% del agua en el cerebro cristalizada en hielo sin efectos adversos; se demostró que otros órganos eran susceptibles de sufrir daños. [7]

La criopreservación se aplicó a materiales humanos a partir de 1954 con tres embarazos resultantes de la inseminación de espermatozoides previamente congelados. [8] El esperma de ave fue criopreservado en 1957 por un equipo de científicos en el Reino Unido dirigido por Christopher Polge . [9] Durante 1963, Peter Mazur, en el Laboratorio Nacional de Oak Ridgeen los EE. UU., demostró que la congelación intracelular letal podría evitarse si el enfriamiento fuera lo suficientemente lento como para permitir que saliera suficiente agua de la célula durante la congelación progresiva del líquido extracelular. Esa tasa difiere entre células de diferente tamaño y permeabilidad al agua: una tasa de enfriamiento típica de alrededor de 1 ° C / minuto es apropiada para muchas células de mamíferos después del tratamiento con crioprotectores como glicerol o dimetilsulfóxido, pero la tasa no es un óptimo universal. [10]

El primer cuerpo humano en ser congelado con la esperanza de un futuro resurgimiento fue el de James Bedford , pocas horas después de su muerte causada por cáncer en 1967. [11] Bedford es el único paciente criónico congelado antes de 1974 que aún se conserva en la actualidad. [12]

Temperatura [ editar ]

Se presume que el almacenamiento a temperaturas muy bajas proporciona una longevidad indefinida a las células, aunque la vida efectiva real es bastante difícil de probar. Los investigadores que experimentaron con semillas secas encontraron que había una notable variabilidad de deterioro cuando las muestras se mantenían a diferentes temperaturas, incluso a temperaturas extremadamente frías . Temperaturas inferiores al punto de transición vítrea (Tg) de las soluciones acuosas de poliol , alrededor de −136 ° C (137 K; −213 ° F), parecen aceptarse como el rango en el que la actividad biológica disminuye sustancialmente y −196 ° C C (77 K; -321 ° F), el punto de ebullición del nitrógeno líquido , es la temperatura preferida para almacenar muestras importantes. Mientras que los refrigeradores, congeladores y congeladores extrafríos se utilizan para muchos artículos, generalmente se requiere el nitrógeno líquido ultrafrío para la conservación exitosa de las estructuras biológicas más complejas para detener virtualmente toda actividad biológica.

Riesgos [ editar ]

Los fenómenos que pueden causar daño a las células durante la criopreservación ocurren principalmente durante la etapa de congelación e incluyen efectos de solución, formación de hielo extracelular , deshidratación y formación de hielo intracelular . Muchos de estos efectos pueden reducirse con crioprotectores . Una vez que el material preservado se ha congelado, está relativamente a salvo de daños mayores. [13]

Efectos de la solución
A medida que los cristales de hielo crecen en el agua helada, se excluyen los solutos , lo que hace que se concentren en el agua líquida restante. Las altas concentraciones de algunos solutos pueden ser muy dañinas.
Formación de hielo extracelular
Cuando los tejidos se enfrían lentamente, el agua sale de las células y se forma hielo en el espacio extracelular. Demasiado hielo extracelular puede causar daño mecánico a la membrana celular debido al aplastamiento.
Deshidración
La migración de agua, que causa la formación de hielo extracelular, también puede causar deshidratación celular. Las tensiones asociadas a la celda pueden causar daños directamente.
Formación de hielo intracelular
Si bien algunos organismos y tejidos pueden tolerar algo de hielo extracelular, cualquier hielo intracelular apreciable casi siempre es fatal para las células.

Principales métodos para prevenir riesgos [ editar ]

Las principales técnicas para prevenir daños por criopreservación son una combinación bien establecida de velocidad controlada y congelación lenta y un nuevo proceso de congelación instantánea conocido como vitrificación .

Congelación programable lenta [ editar ]

Un tanque de nitrógeno líquido , que se utiliza para alimentar un congelador criogénico (para almacenar muestras de laboratorio a una temperatura de aproximadamente -150 ° C).

La congelación lenta y de velocidad controlada , también conocida como congelación programable lenta (SPF) , [14] es un conjunto de técnicas bien establecidas desarrolladas a principios de la década de 1970 que permitieron al primer embrión humanonacimiento congelado Zoe Leyland durante 1984. Desde entonces, las máquinas que congelan muestras biológicas usando secuencias programables, o tasas controladas, se han utilizado en todo el mundo para la biología humana, animal y celular - "congelar" una muestra para preservarla mejor para eventuales descongelar, antes de congelarlo, o crioconservarlo, en nitrógeno líquido. Estas máquinas se utilizan para congelar ovocitos, piel, productos sanguíneos, embriones, espermatozoides, células madre y preservación general de tejidos en hospitales, consultorios veterinarios y laboratorios de investigación de todo el mundo. Por ejemplo, el número de nacidos vivos de embriones congelados 'congelados lentamente' se estima en unos 300.000 a 400.000 o el 20% de los 3 millones de nacimientos estimados por fertilización in vitro ( FIV ). [15]

La congelación intracelular letal puede evitarse si el enfriamiento es lo suficientemente lento como para permitir que salga suficiente agua de la célula durante la congelación progresiva del líquido extracelular. Para minimizar el crecimiento de cristales de hielo extracelulares y la recristalización, [16] se pueden usar biomateriales como alginatos , alcohol polivinílico o quitosano para impedir el crecimiento de cristales de hielo junto con crioprotectores tradicionales de molécula pequeña. [2] Esa tasa difiere entre células de diferente tamaño y permeabilidad al agua : una tasa de enfriamiento típica de aproximadamente 1 ° C / minuto es apropiada para muchas células de mamíferos después del tratamiento con crioprotectores como el glicerol.o dimetilsulfóxido , pero la tasa no es un óptimo universal. La velocidad de 1 ° C / minuto se puede lograr mediante el uso de dispositivos como un congelador de velocidad controlada o un recipiente de congelación portátil de sobremesa. [17]

Varios estudios independientes han proporcionado evidencia de que los embriones congelados almacenados mediante técnicas de congelación lenta pueden, de alguna manera, ser "mejores" que los frescos en FIV. Los estudios indican que el uso de óvulos y embriones congelados en lugar de óvulos y embriones frescos redujo el riesgo de muerte fetal y parto prematuro, aunque todavía se están explorando las razones exactas.

Vitrificación [ editar ]

Los investigadores Greg Fahy y William F. Rall ayudaron a introducir la vitrificación en la criopreservación reproductiva a mediados de la década de 1980. [18] A partir de 2000, los investigadores afirman que la vitrificación proporciona los beneficios de la criopreservación sin daño debido a la formación de cristales de hielo. [19] La situación se volvió más compleja con el desarrollo de la ingeniería de tejidos, ya que tanto las células como los biomateriales deben permanecer libres de hielo para preservar la alta viabilidad y funciones celulares, la integridad de las construcciones y la estructura de los biomateriales. Lilia Kuleshova, [20] quien también fue la primera científica en lograr la vitrificación de ovocitos , dio como resultado un nacimiento vivo en 1999. [21]Para la criopreservación clínica, la vitrificación generalmente requiere la adición de crioprotectores antes del enfriamiento. Los crioprotectores son macromoléculas que se añaden al medio de congelación para proteger las células de los efectos perjudiciales de la formación de cristales de hielo intracelulares o de los efectos de la solución, durante el proceso de congelación y descongelación. Permiten un mayor grado de supervivencia celular durante la congelación, para reducir el punto de congelación, para proteger la membrana celular de las lesiones relacionadas con la congelación. Los crioprotectores tienen alta solubilidad, baja toxicidad a altas concentraciones, bajo peso molecular y la capacidad de interactuar con el agua a través de enlaces de hidrógeno.

En lugar de cristalizar , la solución almibarada se convierte en hielo amorfo , se vitrifica . En lugar de un cambio de fase de líquido a sólido por cristalización, el estado amorfo es como un "líquido sólido", y la transformación se realiza en un rango de temperatura pequeño descrito como temperatura de " transición vítrea ".

La vitrificación del agua se promueve mediante un enfriamiento rápido y se puede lograr sin crioprotectores mediante una disminución extremadamente rápida de la temperatura (megakelvins por segundo). La velocidad necesaria para alcanzar el estado vítreo en agua pura se consideró imposible hasta 2005. [22]

Dos condiciones que normalmente se requieren para permitir la vitrificación son un aumento de la viscosidad y una disminución de la temperatura de congelación. Muchos solutos hacen ambas cosas, pero las moléculas más grandes generalmente tienen un efecto mayor, particularmente sobre la viscosidad. El enfriamiento rápido también promueve la vitrificación.

Para los métodos establecidos de crioconservación, el soluto debe penetrar la membrana celular para lograr una mayor viscosidad y disminuir la temperatura de congelación dentro de la celda. Los azúcares no penetran fácilmente a través de la membrana. Los solutos que lo hacen, como el dimetilsulfóxido , un crioprotector común, suelen ser tóxicos en concentraciones intensas. Uno de los compromisos difíciles de la crioconservación vitrificante se refiere a limitar el daño producido por el propio crioprotector debido a la toxicidad del crioprotector. Las mezclas de crioprotectores y el uso de bloqueadores de hielo han permitido a la empresa de Medicina del siglo XXI vitrificar un riñón de conejo a −135 ° C con su mezcla de vitrificación patentada. Tras el recalentamiento, el riñón se trasplantó con éxito a un conejo, con completa funcionalidad y viabilidad, capaz de sostener al conejo indefinidamente como único riñón en funcionamiento. [23]

Persuflación [ editar ]

La sangre se puede reemplazar con gases nobles inertes y / o gases metabólicamente vitales como el oxígeno , de modo que los órganos se puedan enfriar más rápidamente y se necesite menos anticongelante. Dado que las regiones de tejido están separadas por gas, las pequeñas expansiones no se acumulan, protegiendo así contra la rotura. [24] Una pequeña empresa, Arigos Biomedical, "ya recuperó corazones de cerdo de los 120 grados bajo cero", [25] aunque la definición de "recuperado" no es clara. Las presiones de 60 atm pueden ayudar a aumentar las tasas de intercambio de calor. [26] La perfusión / persuflación de oxígeno gaseoso puede mejorar la preservación de los órganos en relación con el almacenamiento en frío estático o la perfusión de una máquina hipotérmica, ya que la menor viscosidad de los gases puede ayudar a alcanzar más regiones de órganos preservados y entregar más oxígeno por gramo de tejido. [27]

Tejidos congelables [ editar ]

Generalmente, la crioconservación es más fácil para muestras delgadas y células suspendidas, porque estas se pueden enfriar más rápidamente y, por lo tanto, requieren menores dosis de crioprotectores tóxicos . Por lo tanto, la crioconservación de hígados y corazones humanos para su almacenamiento y trasplante sigue siendo poco práctica.

No obstante, las combinaciones adecuadas de crioprotectores y los regímenes de enfriamiento y enjuague durante el calentamiento a menudo permiten la crioconservación exitosa de materiales biológicos, particularmente suspensiones celulares o muestras de tejido fino. Ejemplos incluyen:

  • Semen en la criopreservación de semen
  • Sangre
    • Células especiales para transfusión como plaquetas (trombosomas de Cellphire)
    • Células madre . Es óptimo en alta concentración de suero sintético, equilibrio escalonado y enfriamiento lento. [28]
    • Sangre de cordón umbilical en un banco de sangre de cordón
  • Muestras de tejido como tumores y cortes transversales histológicos
  • Huevos ( ovocitos ) en criopreservación de ovocitos
  • Embriones en etapa de escisión (que son 2, 4, 8 o 16 células) o en etapa temprana de blastocisto, en criopreservación de embriones
  • Tejido ovárico en la criopreservación del tejido ovárico
  • Las semillas de las plantas o las puntas de los brotes o las yemas latentes se criopreservan con fines de conservación . [29]

Embriones [ editar ]

Artículo principal: criopreservación de embriones

La criopreservación de embriones se utiliza para el almacenamiento de embriones, por ejemplo, cuando la fertilización in vitro (FIV) ha dado lugar a más embriones de los que se necesitan actualmente.

Se ha informado de un embarazo y un parto saludable resultante de un embrión almacenado durante 27 años después del embarazo exitoso de un embrión del mismo lote tres años antes. [30] Muchos estudios han evaluado a los niños nacidos de embriones congelados o "frosties". El resultado ha sido uniformemente positivo sin aumento de defectos de nacimiento o anomalías del desarrollo. [31] Un estudio de más de 11.000 embriones humanos criopreservados no mostró un efecto significativo del tiempo de almacenamiento sobre la supervivencia después de la descongelación para los ciclos de FIV o de donación de ovocitos, o para los embriones congelados en las etapas pronuclear o de escisión. [32]Además, la duración del almacenamiento no tuvo ningún efecto significativo sobre el embarazo clínico, el aborto espontáneo, la implantación o la tasa de nacidos vivos, ya sea por FIV o por ciclos de donación de ovocitos. [32] Más bien, la edad de los ovocitos, la proporción de supervivencia y el número de embriones transferidos son predictores del resultado del embarazo. [32]

Tejido ovárico [ editar ]

Artículo principal: criopreservación de tejido ovárico

La criopreservación del tejido ovárico es de interés para las mujeres que desean preservar su función reproductiva más allá del límite natural, o cuyo potencial reproductivo está amenazado por la terapia del cáncer, [33] por ejemplo en neoplasias hematológicas o cáncer de mama. [34] El procedimiento consiste en tomar una parte del ovario y realizar una congelación lenta antes de almacenarlo en nitrógeno líquido mientras se lleva a cabo la terapia. Luego, el tejido puede descongelarse e implantarse cerca del Falopio, ya sea ortotópico (en la ubicación natural) o heterotópico (en la pared abdominal), [34] donde comienza a producir nuevos óvulos, lo que permite que ocurra una concepción normal. [35] El tejido ovárico también se puede trasplantar a ratones inmunodeprimidos ( ratones SCID) para evitar el rechazo del injerto , y el tejido se puede recolectar más tarde, cuando se hayan desarrollado folículos maduros. [36]

Ovocitos [ editar ]

Artículo principal: criopreservación de ovocitos

La criopreservación de ovocitos humanos es una nueva tecnología en la que se extraen, congelan y almacenan los óvulos de una mujer ( ovocitos ). Más tarde, cuando esté lista para quedar embarazada, los óvulos pueden descongelarse, fertilizarse y transferirse al útero como embriones . Desde 1999, cuando Kuleshova y sus colaboradores informaron en la revista Human Reproduction del nacimiento del primer bebé de un embrión derivado de óvulos de mujer vitrificados y calentados, [20] este concepto ha sido reconocido y generalizado. Este avance en el logro de la vitrificación de los ovocitos de una mujer supuso un avance importante en nuestro conocimiento y práctica del proceso de FIV, ya que la tasa de embarazo clínico es cuatro veces mayor después de la vitrificación de ovocitos que después de la congelación lenta. [37] La vitrificación de ovocitos es vital para preservar la fertilidad en pacientes oncológicos jóvenes y para individuos sometidos a FIV que se oponen, por razones religiosas o éticas, a la práctica de congelar embriones.

Semen [ editar ]

Artículo principal: criopreservación de semen

El semen se puede utilizar con éxito casi indefinidamente después de la criopreservación. El almacenamiento exitoso más largo registrado es de 22 años. [38] Se puede usar para la donación de esperma cuando el receptor desea el tratamiento en un momento o lugar diferente, o como un medio para preservar la fertilidad en hombres que se someten a vasectomía o tratamientos que pueden comprometer su fertilidad, como quimioterapia , radioterapia o cirugía. .

Tejido testicular [ editar ]

Artículo principal: Criopreservación de tejido testicular.

La criopreservación de tejido testicular inmaduro es un método en desarrollo para aprovechar la reproducción de los niños pequeños que necesitan una terapia gonadotóxica. Los datos en animales son prometedores, ya que se han obtenido descendientes sanos tras el trasplante de suspensiones de células testiculares congeladas o trozos de tejido. Sin embargo, ninguna de las opciones de restauración de la fertilidad a partir de tejido congelado, es decir, el trasplante en suspensión celular, el injerto de tejido y la maduración in vitro (MIV), ha demostrado ser eficaz y segura en humanos hasta el momento. [39]

Musgo [ editar ]

Cuatro ecotipos diferentes de Physcomitrella patens almacenados en el IMSC .

La criopreservación de plantas de musgo enteras , especialmente Physcomitrella patens , ha sido desarrollada por Ralf Reski y colaboradores [40] y se lleva a cabo en el International Moss Stock Center . Este biobanco recolecta, conserva y distribuye mutantes de musgo y ecotipos de musgo . [41]

Células estromales mesenquimales (MSC) [ editar ]

Las MSC, cuando se transfunden inmediatamente dentro de unas pocas horas después de la descongelación, pueden mostrar una función reducida o mostrar una menor eficacia en el tratamiento de enfermedades en comparación con las MSC que están en fase logarítmica de crecimiento celular (frescas). Como resultado, las CMM criopreservadas deben volver a la fase logarítmica de crecimiento celular en cultivo in vitro antes de que se administren para ensayos clínicos o terapias experimentales. El re-cultivo de MSC ayudará a recuperarse del impacto que reciben las células durante la congelación y descongelación. Varios ensayos clínicos sobre MSC han fracasado en los que se utilizaron productos crioconservados inmediatamente después de la descongelación en comparación con los ensayos clínicos que utilizaron MSC frescas. [42]

Conservación de cultivos microbiológicos [ editar ]

Las bacterias y los hongos se pueden mantener refrigerados a corto plazo (meses a aproximadamente un año, dependiendo), sin embargo, la división celular y el metabolismo no se detienen por completo y, por lo tanto, no es una opción óptima para el almacenamiento a largo plazo (años) o para preservar cultivos genéticamente. o fenotípicamente, ya que las divisiones celulares pueden provocar mutaciones o el subcultivo puede provocar cambios fenotípicos. Una opción preferida, dependiente de la especie, es la crioconservación. Los gusanos nematodos son los únicos eucariotas multicelulares que se ha demostrado que sobreviven a la criopreservación. [43] Shatilovich AV, Tchesunov AV, Neretina TV, Grabarnik IP, Gubin SV, Vishnivetskaya TA, Onstott TC, Rivkina EM (mayo de 2018). "Nematodos viables del permafrost del Pleistoceno tardío de las tierras bajas del río Kolyma".Doklady Biological Sciences: Actas de la Academia de Ciencias de la URSS, Secciones de Ciencias Biológicas . 480 (1): 100-102. doi : 10.1134 / S0012496618030079 . PMID  30009350 . S2CID  49743808 .

Hongos [ editar ]

Los hongos, en particular zigomicetos, ascomicetos y basidiomicetos superiores, independientemente de la esporulación, pueden almacenarse en nitrógeno líquido o ultracongelarse. La cripreservación es un método distintivo para los hongos que no esporulan (de lo contrario, se pueden usar otros métodos de conservación de esporas a menor costo y facilidad), esporulan pero tienen esporas delicadas (grandes o sensibles a la congelación), son patógenos (es peligroso mantenerlas metabólicamente activas hongo) o se utilizarán para reservas genéticas (idealmente para tener una composición idéntica a la del depósito original). Como ocurre con muchos otros organismos, los crioprotectores como el DMSO o el glicerol(por ejemplo, hongos filamentosos con glicerol al 10% o levadura con glicerol al 20%). Las diferencias entre la elección de crioprotectores dependen de la especie (o clase), pero generalmente para los hongos, los crioprotectores penetrantes como el DMSO, el glicerol o el polietilenglicol son los más efectivos (otros no penetrantes incluyen azúcares manitol, sorbitol, dextrano, etc.). No se recomienda la repetición de congelación-descongelación ya que puede disminuir la viabilidad. Se recomiendan congeladores de respaldo o sitios de almacenamiento de nitrógeno líquido. A continuación se resumen varios protocolos de congelación (cada uno utiliza criotubos de polipropileno con tapón de rosca): [44]

Bacterias [ editar ]

Muchas cepas de laboratorio cultivables comunes se congelan para preservar poblaciones genéticamente y fenotípicamente estables a largo plazo. [45]El subcultivo y las muestras refrigeradas prolongadas pueden provocar la pérdida de plásmidos o mutaciones. Los porcentajes de glicerol finales comunes son 15, 20 y 25. A partir de una placa de cultivo reciente, se elige una única colonia de interés y se hace un cultivo líquido. Del cultivo líquido, el medio se mezcla directamente con la misma cantidad de glicerol; la colonia debe ser revisada para detectar defectos como mutaciones. Todos los antibióticos deben lavarse del cultivo antes de su almacenamiento a largo plazo. Los métodos varían, pero la mezcla se puede hacer suavemente por inversión o rápidamente mediante vórtice y el enfriamiento puede variar colocando el criotubo directamente a -50 a -95 ° C, congelando en nitrógeno líquido o enfriándolo gradualmente y luego almacenándolo a -80 ° C C o más frío (nitrógeno líquido o vapor de nitrógeno líquido). La recuperación de bacterias también puede variar,es decir, si las perlas se almacenan dentro del tubo, entonces las pocas perlas se pueden usar para colocar en placa o el stock congelado se puede raspar con un lazo y luego platear, sin embargo, dado que solo se necesita un poco de stock, el tubo completo nunca debe descongelarse por completo y congelarse repetidamente -Debe evitarse el deshielo. La recuperación del 100% no es factible independientemente de la metodología.[46] [47] [48]

Tolerancia a la congelación en animales [ editar ]

Gusanos [ editar ]

Los nematodos nematodos microscópicos que habitan en el suelo Panagrolaimus detritophagus y Plectus parvus son los únicos organismos eucariotas que han demostrado ser viables después de la criopreservación a largo plazo hasta la fecha. En este caso, la conservación fue más natural que artificial, debido al permafrost .

Vertebrados [ editar ]

Se ha demostrado que varias especies animales, incluidos peces, anfibios y reptiles, toleran la congelación. Estas especies incluyen al menos cuatro especies de ranas ( Pseudacris crucifer , Hyla versicolor , Pseudacris triseriata , Lithobates sylvaticus ) y varias especies de tortugas ( Terrapene carolina , cría de Chrysemys picta ), lagartos y serpientes tolerantes a las heladas y han desarrollado adaptaciones para sobrevivir a las heladas. . Mientras que algunas ranas hibernan bajo tierra o en el agua, la temperatura corporal aún desciende de -5 a -7 ° C, lo que hace que se congelen. La rana de madera (Lithobates sylvaticus)puede soportar congelaciones repetidas, durante las cuales aproximadamente el 65% de su líquido extracelular se convierte en hielo. [45]

Ver también [ editar ]

  • Células del sistema Alive congeladores
  • Criobiología
  • Crioconservación de recursos zoogenéticos
  • Crioconservación de recursos fitogenéticos
  • Criogenia
  • Criónica
  • Criostasis (hidratos de clatrato)
  • Procesador criogénico
  • Conservación ex situ
  • Zoológico congelado
  • Criopreservación de tejido testicular

Referencias [ editar ]

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Lectura adicional [ editar ]

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