3,3 ′, 5,5′-tetrametilbencidina o TMB es un sustrato cromogénico utilizado en procedimientos de tinción en inmunohistoquímica , además de ser un reactivo de visualización utilizado en ensayos de inmunoabsorción ligados a enzimas ( ELISA ). [1] TMB es un sólido blanco que forma un líquido azul verdoso pálido en solución con acetato de etilo . TMB se degrada con la luz solar y con luces fluorescentes .
Nombres | |
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Nombre IUPAC preferido 3,3 ′, 5,5′-tetrametil [1,1′-bifenil] -4,4′-diamina | |
Otros nombres 3,3 ′, 5,5′-tetrametilbifenil-4,4'-diamina | |
Identificadores | |
Modelo 3D ( JSmol ) | |
ChemSpider | |
Tarjeta de información ECHA | 100.053.949 |
UNII | |
Tablero CompTox ( EPA ) | |
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Propiedades | |
C 16 H 20 N 2 | |
Masa molar | 240,3482 g / mol |
Punto de fusion | 168 a 171 ° C (334 a 340 ° F; 441 a 444 K) |
Peligros | |
Ficha de datos de seguridad | MSDS externa |
Salvo que se indique lo contrario, los datos se proporcionan para materiales en su estado estándar (a 25 ° C [77 ° F], 100 kPa). | |
verificar ( ¿qué es ?) | |
Referencias de Infobox | |
Ensayo enzimático
TMB puede actuar como donante de hidrógeno para la reducción del peróxido de hidrógeno a agua mediante enzimas peroxidasa como la peroxidasa de rábano picante .
La diimina resultante hace que la solución adopte un color azul, y este cambio de color se puede leer en un espectrofotómetro en las longitudes de onda de 370 y 650 nm.
La reacción se puede detener mediante la adición de ácido u otro reactivo de parada . El uso de ácido sulfúrico hace que TMB se vuelva amarillo. El color se puede leer a 450 nm. [2]
Seguridad del material
TMB debe mantenerse alejado de la luz solar directa ya que es fotosensible. No se sabe si TMB es carcinogénico y la evidencia es contradictoria: TMB no es mutagénico por la prueba de Ames , [3] [4] [5] [6] y no indujo la formación de tumores en un estudio de un solo brazo de 24 ratas. [3] Sobre la base de esas pruebas, se ha utilizado como sustituto de compuestos cancerígenos como la bencidina [7] y la o-fenilendiamina.
Referencias
- ^ Entrada de catálogo Sigma Aldrich para 3,3 ′, 5,5′-tetrametilbencidina
- ^ Martin TL; Mufson EJ; Mesulam MM (1984). "El lado bueno de la histoquímica de peroxidasa de rábano picante" . J Histochem Cytochem . 32 (7): 793. doi : 10.1177 / 32.7.6736628 . PMID 6736628 .
- ^ a b Holanda VR; Saunders BC; Rose FL; Walpole AL (1974). "Un sustituto más seguro de la bencidina en la detección de sangre". Tetraedro . 30 (18): 3299. doi : 10.1016 / S0040-4020 (01) 97504-0 .
- ^ Ashby J; Paton D; Lefevre PA; Styles JA; Rose FL (1982). "Evaluación de dos métodos sugeridos para desactivar carcinógenos orgánicos mediante modificación molecular". Carcinogénesis . 3 (11): 1277–1282. doi : 10.1093 / carcin / 3.11.1277 . PMID 6758975 .
- ^ Chung KT; Chen SC; Wong TY; Li YS; Wei CI; Chou MW (2000). "Estudios de mutagenicidad de la bencidina y sus análogos: relaciones estructura-actividad" . Toxicol Sci . 56 (2): 351–356. doi : 10.1093 / toxsci / 56.2.351 . PMID 10910993 .
- ^ Chung KT; Chen SC; Claxton LD (2006). "Revisión de la mutagenicidad de Salmonella typhimurium de bencidina, análogos de bencidina y colorantes a base de bencidina". Investigación de mutaciones / revisiones en la investigación de mutaciones . 612 (1): 58–76. doi : 10.1016 / j.mrrev.2005.08.001 . PMID 16198141 .
- ^ Yang J; Wang H; Zhang H (2008). "Síntesis en un recipiente de nanoplacas de plata y nanofibras del complejo de transferencia de carga". J Phys Chem C . 112 (34): 13065–13069. doi : 10.1021 / jp802604d .