La anexina A5 (o anexina V ) es una proteína celular del grupo de las anexinas . En citometría de flujo, la anexina V se usa comúnmente para detectar células apoptóticas por su capacidad para unirse a fosfatidilserina, un marcador de apoptosis cuando se encuentra en la valva externa de la membrana plasmática. Se desconoce la función de la proteína; sin embargo, se ha propuesto que la anexina A5 desempeña un papel en la inhibición de la coagulación sanguínea al competir por los sitios de unión de la fosfatidilserina con la protrombina y también al inhibir la actividad de la fosfolipasa A1. Estas propiedades se han descubierto mediante experimentos in vitro .
Los anticuerpos dirigidos contra la anexina A5 se encuentran en pacientes con una enfermedad llamada síndrome antifosfolípido (APS), una enfermedad trombofílica asociada con autoanticuerpos contra compuestos fosfolípidos.
La anexina A5 forma un escudo alrededor de las moléculas de fosfolípidos con carga negativa. La formación de un escudo de anexina A5 bloquea la entrada de fosfolípidos en las reacciones de coagulación (coagulación). En el síndrome de anticuerpos antifosfolípidos, los anticuerpos interrumpen la formación del escudo. Sin el escudo, hay una mayor cantidad de moléculas de fosfolípidos en las membranas celulares, lo que acelera las reacciones de coagulación y provoca la característica de coagulación sanguínea del síndrome de anticuerpos antifosfolípidos.
La anexina A5 mostró una regulación positiva en el carcinoma papilar de tiroides . [5]
La anexina A5 se usa como una sonda no cuantitativa para detectar células que han expresado fosfatidilserina (PS) en la superficie celular, un evento que se encuentra en la apoptosis , así como en otras formas de muerte celular. [6] [7] [8] Las plaquetas también exponen PS y PE en su superficie cuando se activan, lo que sirve como sitio de unión para varios factores de coagulación.
El ensayo de afinidad de anexina A5 normalmente usa un conjugado de anexina V y un marcador fluorescente o enzimático, biotina u otros marcadores, o un radioelemento, en un tampón adecuado (la unión de la anexina V a los aminofosfolípidos depende del Ca 2+ ). El ensayo combina la tinción con anexina V de los eventos de membrana de PS y PE con la tinción del ADN en el núcleo celular con yoduro de propidio (PI) o 7-Aminoactinomicina D (AAD-7), distinguiendo las células viables de las células apoptóticas y necróticas . [9] La detección se produce mediante citometría de flujo o un microscopio de fluorescencia .
Se ha demostrado que la anexina A5 interactúa con el receptor del dominio de inserción de quinasa [10] y la integrina beta 5 . [11]