El suberato de bisulfosuccinimidilo (BS3) es un reticulante utilizado en la investigación biológica. Es una versión soluble en agua del suberato de disuccinimidilo .
Nombres | |
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Nombre IUPAC Ácido 1- [8- (2,5-dioxo-3-sulfopirrolidin-1-il) oxi-8-oxooctanoil] oxi-2,5-dioxopirrolidin-3-sulfónico | |
Otros nombres Suberato de disulfosuccinimidilo; Suberato de bis (sulfosuccinimidilo); BS3 | |
Identificadores | |
Modelo 3D ( JSmol ) | |
ChemSpider | |
Tarjeta de información ECHA | 100.110.895 |
PubChem CID | |
UNII | |
Tablero CompTox ( EPA ) | |
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Propiedades | |
C 16 H 20 N 2 O 14 S 2 | |
Masa molar | 528,46 g · mol −1 |
Salvo que se indique lo contrario, los datos se proporcionan para materiales en su estado estándar (a 25 ° C [77 ° F], 100 kPa). | |
verificar ( ¿qué es ?) | |
Referencias de Infobox | |
Reticuladores
Los reticulantes son reactivos químicos que juegan un papel crucial en la preparación de conjugados utilizados en la investigación biológica, particularmente en inmunotecnologías y estudios de proteínas. Los reticuladores están diseñados para interactuar covalentemente con moléculas de interés, lo que da como resultado una conjugación. Un brazo espaciador , que generalmente consta de varios átomos, separa las dos moléculas, y es importante considerar la naturaleza y la longitud de este espaciador al diseñar un ensayo que involucre al reticulante seleccionado. El suberato de bisulfosuccinimidilo es un ejemplo de reticulante homobifuncional.
Caracteristicas
Soluble en agua: BS3 es hidrófilo debido a sus sustituyentes sulfonilo terminales y, como resultado, se disocia en agua, eliminando la necesidad de utilizar disolventes orgánicos que interfieren con la estructura y función de las proteínas. Dado que no es necesario utilizar disolventes orgánicos cuando se utiliza BS3 como reticulante, es ideal para investigaciones sobre la estructura y función de las proteínas en condiciones fisiológicas.
No escindible: el reticulante BS3 tiene un espaciador de 8 átomos, no es escindible y la molécula no es permeable a la membrana celular. BS3 se une irreversiblemente a sus moléculas conjugadas, lo que significa que una vez que BS3 crea enlaces covalentes con sus moléculas objetivo, esas asociaciones no se rompen fácilmente.
Impermeable a la membrana: dado que BS3 es una molécula cargada, no puede atravesar libremente las membranas celulares, lo que la convierte en un reticulante ideal para las proteínas de la superficie celular.
Homobifuncional: BS3 es un reticulante homobifuncional porque tiene dos grupos reactivos idénticos, es decir, los ésteres de N -hidroxisulfosuccinimida, y solo es necesario un paso para establecer la reticulación entre las moléculas conjugadas.
Reactivo con amina: BS3 es reactivo con amina porque sus ésteres de N -hidroxisulfosuccinimida (NHS) en cada extremo reaccionan específicamente con aminas primarias para formar enlaces amida estables en una reacción de tipo sustitución de acilo nucleófilo en la que la N -hidroxisulfosuccinimida actúa como grupo saliente . BS3 es particularmente útil en aplicaciones relacionadas con proteínas porque puede reaccionar con las aminas primarias en la cadena lateral de los residuos de lisina y el extremo N de las cadenas polipeptídicas. Este reticulante también se puede usar para estabilizar interacciones proteína-proteína para un análisis adicional mediante inmunoprecipitación.
BS3 deuterado
El reticulante deuterado bis (sulfosuccinimidil) 2,2,7,7-suberato-d4 es el agente reticulante BS3 "pesado" que contiene 4 átomos de deuterio. Cuando se utiliza en estudios de espectrometría de masas , BS3-d4 proporciona un cambio de 4 dalton en comparación con las proteínas reticuladas con el análogo no deuterado (BS3-d 0 ). Por tanto, los análogos de reticuladores "pesados" y "ligeros" pueden usarse para marcar isotópicamente proteínas y péptidos en aplicaciones de investigación de espectrometría de masas.
Aplicaciones
- Estudios de ligando-receptor de superficie celular
- Biomoléculas reticuladas en células
- Fijación de complejos de proteínas antes del análisis de interacción de proteínas
Suberato de disuccinimidilo
El suberato de disuccinimidilo (DSS) es el análogo no soluble en agua de BS3. DSS y BS3 expresan la misma capacidad de reticulación hacia aminas primarias. La principal diferencia estructural entre estas dos moléculas es que el DSS no contiene los sustituyentes sulfonato en ninguno de los extremos de la molécula, y es esta diferencia la responsable de la naturaleza no polar y sin carga de la molécula del DSS. Debido a la naturaleza hidrófoba de este reticulante, debe disolverse en un disolvente orgánico como dimetilsulfóxido antes de añadirlo a una muestra acuosa. Debido a la capacidad del DSS para atravesar las membranas celulares, es más adecuado para aplicaciones donde se necesita reticulación intracelular.