Unidad de formación de Colonia
Una unidad formadora de colonias ( UFC, UFC, UFC ) es una unidad utilizada en microbiología . Calcula el número de bacterias o células fúngicas en una muestra que son viables , capaces de multiplicarse mediante fisión binaria en condiciones controladas. El recuento con unidades formadoras de colonias requiere cultivar los microbios y contar solo las células viables, en contraste con el examen microscópico que cuenta todas las células, vivas o muertas. La apariencia visual de una colonia en un cultivo celular requiere un crecimiento significativo y, al contar las colonias, no se sabe si la colonia surgió de una célula o de un grupo de células. Expresar los resultados como unidades formadoras de colonias refleja esta incertidumbre.
El propósito del recuento en placa es estimar el número de células presentes en función de su capacidad para dar lugar a colonias en condiciones específicas de medio nutriente, temperatura y tiempo. En teoría, una célula viable puede dar lugar a una colonia mediante la replicación. Sin embargo, las células solitarias son la excepción en la naturaleza, y lo más probable es que el progenitor de la colonia fuera una masa de células depositadas juntas. [ cita requerida ] Además, muchas bacterias crecen en cadenas (por ejemplo, Streptococcus ) o grupos (por ejemplo, Staphylococcus). La estimación del número de microbios por UFC, en la mayoría de los casos, subestimará el número de células vivas presentes en una muestra por estas razones. Esto se debe a que el recuento de CFU supone que cada colonia está separada y fundada por una única célula microbiana viable. [1]
El recuento en placa es lineal para E. coli en el rango de 30 a 300 UFC en una placa de Petri de tamaño estándar . [2] Por lo tanto, para garantizar que una muestra produzca UFC en este rango, se requiere la dilución de la muestra y la siembra en placas de varias diluciones. Normalmente, se utilizan diluciones de diez veces y la serie de diluciones se coloca en placas en réplicas de 2 o 3 en el intervalo de diluciones elegido. A menudo se colocan en placa 100 µl, pero también se utilizan cantidades mayores de hasta 1 ml. Los volúmenes de galvanoplastia más altos aumentan los tiempos de secado, pero a menudo no dan como resultado una mayor precisión, ya que pueden ser necesarios pasos de dilución adicionales. [3]La UFC / placa se lee de una placa en el rango lineal, y luego las UFC / g (o UFC / mL) del original se deducen matemáticamente, teniendo en cuenta la cantidad plateada y su factor de dilución (p. Ej. CLSI VET01S ).
Una ventaja de este método es que diferentes especies microbianas pueden dar lugar a colonias que son claramente diferentes entre sí, tanto microscópicamente como macroscópicamente . La morfología de la colonia puede ser de gran utilidad en la identificación del microorganismo presente. [ cita requerida ]
Una comprensión previa de la anatomía microscópica del organismo puede brindar una mejor comprensión de cómo la UFC / ml observada se relaciona con la cantidad de células viables por mililitro. Alternativamente, es posible disminuir el número promedio de células por UFC en algunos casos agitando la muestra antes de realizar la dilución. Sin embargo, muchos microorganismos son delicados y sufrirían una disminución en la proporción de células que son viables cuando se colocan en un vórtice. [ cita requerida ]
Las concentraciones de unidades formadoras de colonias se pueden expresar usando notación logarítmica, donde el valor mostrado es el logaritmo en base 10 de la concentración. [4] [5] [6] Esto permite que la reducción logarítmica de un proceso de descontaminación se calcule como una simple resta.
