La proteína 1 de choque térmico de 10 kDa ( Hsp10 ), también conocida como chaperonina 10 ( cpn10 ) o factor de embarazo temprano ( EPF ), es una proteína que en humanos está codificada por el gen HSPE1 . El homólogo en E. coli es GroES , que es una chaperonina que normalmente funciona junto con GroEL . [5]
GroES existe como un oligómero en forma de anillo de entre seis y ocho subunidades idénticas, mientras que la chaperonina de 60 kDa (cpn60 - o groEL en bacterias) forma una estructura que comprende 2 anillos apilados, cada anillo contiene 7 subunidades idénticas . [6] Estas estructuras anulares se ensamblan por autoestimulación en presencia de Mg 2+ -ATP. La cavidad central del tetradecámero cpn60 cilíndrico proporciona un entorno aislado para el plegamiento de proteínas, mientras que cpn-10 se une a cpn-60 y sincroniza la liberación de la proteína plegada de manera dependiente de Mg 2+ -ATP. [7] La uniónde cpn10 a cpn60 inhibe la débil actividad ATPasa de cpn60.
También se ha demostrado que Escherichia coli GroES se une al ATP de forma cooperativa y con una afinidad comparable a la de GroEL. [8] Cada subunidad GroEL contiene tresdominios estructuralmente distintos: un dominio apical, uno intermedio y uno ecuatorial. El dominio apical contiene los sitios de unión tanto para GroES como para el sustrato proteico desplegado. El dominio ecuatorial contiene el sitio de unión de ATP y la mayoría de los contactos oligoméricos. El dominio intermedio une los dominios apical y ecuatorialy transfiere alostéricosinformación entre ellos. El oligómero GroEL es un tetradecámero, de forma cilíndrica, que está organizado en dos anillos heptaméricos apilados espalda con espalda. Cada anillo de GroEL contiene una cavidad central, conocida como " jaula de Anfinsen ", que proporciona un entorno aislado para el plegamiento de proteínas. Las subunidades idénticas de 10 kDa de GroES forman un oligómero heptamérico en forma de domo en solución. La unión de ATP a GroES puede ser importante en la carga de las siete subunidades del anillo GroEL que interactúa con ATP, para facilitar la unión e hidrólisis cooperativas de ATP para la liberación de proteínas de sustrato.
El factor de embarazo temprano se prueba para el ensayo de inhibición de rosetas . EPF está presente en el suero materno ( plasma sanguíneo ) poco después de la fertilización; El EPF también está presente en el moco cervical [11] y en el líquido amniótico . [12]
El EPF se puede detectar en ovejas dentro de las 72 horas posteriores al apareamiento, [13] en ratones dentro de las 24 horas posteriores al apareamiento, [14] y en muestras de medios que rodean embriones humanos fertilizados in vitro dentro de las 48 horas posteriores a la fertilización [15] (aunque otro estudio fracasó duplicar este hallazgo para embriones in vitro ). [16] El EPF se ha detectado tan pronto como dentro de las seis horas posteriores al apareamiento. [17]
Debido a que el ensayo de inhibición de rosetas para EPF es indirecto, las sustancias que tienen efectos similares pueden confundir la prueba. Se ha demostrado que el semen de cerdo , como el EPF, inhibe la formación de rosetas: la prueba de inhibición de rosetas fue positiva durante un día en cerdas apareadas con un verraco vasectomizado, pero no en cerdas estimuladas de manera similar sin exposición al semen. [18] Varios estudios en los años posteriores al descubrimiento de EPF no pudieron reproducir la detección consistente de EPF en hembras posconcepcionales, y se cuestionó la validez de los experimentos de descubrimiento. [19] Sin embargo, se ha avanzado en la caracterización de EPF y su existencia es bien aceptada en la comunidad científica. [20] [21]