El método Kinyoun o tinción Kinyoun (método frío), desarrollado por Joseph J. Kinyoun , es un procedimiento utilizado para teñir especies ácido-resistentes de los géneros bacterianos Mycobacterium y Nocardia [1] y el género apicomplexan Cryptosporidium . Es una variación de un método desarrollado por Robert Koch en 1882. Ciertas especies de bacterias tienen un lípido ceroso llamado ácido micólico en sus paredes celulares que les permite teñirse con Acid-Fast mejor que con Gram-Stain. La capacidad única de las micobacterias para resistir la decoloración por el alcohol ácido es la razón por la que se denominan resistentes a los ácidos. [2]Consiste en la aplicación de una tinción primaria ( fucsina básica ), un decolorante (ácido-alcohol) y una contratinción ( azul de metileno ). [3] A diferencia de la tinción de Ziehl-Neelsen ( tinción ZN), el método de tinción Kinyoun no requiere calentamiento. [4] [5] En la tinción de Ziehl-Neelsen, el calor actúa como un mordiente físico, mientras que el fenol (carbol de carbol fuschin) actúa como el mordiente químico. Dado que la tinción de Kinyoun es un método en frío (sin aplicación de calor), se aumenta la concentración de carbol fuschin utilizada. [6]
Aplicación de | Reactivo | Color de la celda | |
---|---|---|---|
Ácido rápido | No ácido rápido | ||
Tinte primario | Carbol fucsina | rojo | rojo |
Decolorante | Alcohol ácido | rojo | Incoloro |
Contador de manchas | Azul de metileno | rojo | Azul |
Procedimiento de tinción
Haz una mancha resistente a los ácidos [7]
Materiales
- Portaobjetos con frotis de microorganismos
- Carbol fucsina
- Alcohol ácido
- Azul de metileno
- papel absorbente
- Microscopio
Instrucciones
- Hacer un frotis en un portaobjetos con organismos.
- Limpiar el portaobjetos, encerar el portaobjetos, extender el organismo, secar al aire durante 10 minutos, fijar con calor
- Sumerja el portaobjetos en Carbol Fuchsin durante 20 minutos.
- Enjuague el portaobjetos
- Sumerja el portaobjetos en alcohol ácido durante 3-5 segundos.
- Enjuague diapositiva
- Sumerja el portaobjetos en azul de metileno durante 30 segundos.
- Enjuague diapositiva
- Seque el portaobjetos con papel absorbente.
- Observe al microscopio.
Modificación
El método Kinyoun se puede modificar como una tinción ácido-resistente débil, que utiliza ácido sulfúrico al 5% en lugar de ácido clorhídrico. La tinción ácido-resistente débil además de teñir micobacterias teñirá los organismos que no son capaces de mantener la carbol fucsina después de decolorar con HCl.
Ver también
Referencias
- ^ Geo F. B et al, Microbiología médica de Jawetz, Melnick y Adelberg, 25a edición, Lange Medical, 2004, página 182
- ^ .dalynn (octubre de 2014). "TINTURA KINYOUN CARBOL FUCHSIN" (PDF) .
- ^ Hussey, AM, Zayaitz, A., "Acid-Fast Stain Protocols" Archivado 2011-10-01 en Wayback Machine , American Society for Microbiology , 8 de septiembre de 2008. Consultado el 1 de noviembre de 2014.
- ^ Murray PR, Baron E, Pfaller M, Tenover F, Yolken, Eds. Manual de microbiología clínica. 7ª ed. Washington, DC: ASM, 1999.
- ^ Barón EJ, Finegold SM. Microbiología diagnóstica de Bailey y Scott. 8ª ed. San Luis: Mosby, 1990.
- ^ Libro de texto de microbiología de Ananthanarayan y Panicker, novena edición, Universities Press (India), 2013, página 353
- ^ https://faculty.mtsac.edu/cbriggs/Micr-22NewLabmanual2Aug2018.pdf