La solidez a los ácidos es una propiedad física de ciertas células bacterianas y eucariotas , así como de algunas estructuras subcelulares, específicamente su resistencia a la decoloración por ácidos durante los procedimientos de tinción de laboratorio . [1] [2] Una vez teñidos como parte de una muestra, estos organismos pueden resistir los procedimientos de decoloración a base de ácido y / o etanol comunes en muchos protocolos de tinción, de ahí el nombre ácido-resistente . [2]
Los mecanismos de resistencia a los ácidos varían según la especie, aunque el ejemplo más conocido es el del género Mycobacterium , que incluye las especies responsables de la tuberculosis y la lepra. La resistencia a los ácidos de las micobacterias se debe al alto contenido de ácido micólico de sus paredes celulares , que es responsable del patrón de tinción de mala absorción seguido de alta retención. Algunas bacterias también pueden ser parcialmente acidorresistentes, como Nocardia .
Los organismos acidorresistentes son difíciles de caracterizar usando técnicas microbiológicas estándar, aunque pueden teñirse con tintes concentrados, particularmente cuando el proceso de tinción se combina con calor. Algunas, como las micobacterias , se pueden teñir con la tinción de Gram , pero no toman bien el cristal violeta y, por lo tanto, aparecen de color púrpura claro, lo que aún puede resultar en una identificación grampositiva incorrecta. [3]
La técnica de tinción más común utilizada para identificar bacterias acidorresistentes es la tinción de Ziehl-Neelsen , en la que las especies acidorresistentes se tiñen de rojo brillante y se destacan claramente sobre un fondo azul. Otro método es el método Kinyoun , en el que las bacterias se tiñen de rojo brillante y se destacan claramente sobre un fondo verde. Las micobacterias acidorresistentes también se pueden visualizar mediante microscopía de fluorescencia utilizando tintes fluorescentes específicos ( tinción de auramina-rodamina , por ejemplo). [4] Los huevos del parásito trematodo pulmonar Paragonimus westermani en realidad son destruidos por la tinción, lo que puede dificultar el diagnóstico en pacientes que presentan síntomas similares a los de la tuberculosis [ cita requerida ] .
Algunas técnicas de tinción acidorresistentes
- Tinción de Ziehl-Neelsen (tipos de blanqueadores clásicos y modificados) [5]
- Tinción de kinyoun
- Para las personas daltónicas (o en entornos donde la detección de bacterias rojas es difícil), el azul Victoria se puede sustituir por carbol fucsina y el ácido pícrico se puede utilizar como contratinción en lugar del azul de metileno , y se puede utilizar el resto de la técnica Kinyoun. [6]
- Varias técnicas de tinción de esporas bacterianas utilizando Kenyon, p. Ej.
- El método de Moeller
- Método de Dorner [7] (decolorante de alcohol ácido) sin la modificación de Schaeffer-Fulton [8] (decolorar con agua) [9]
- Método detergente, utilizando Tergitol 7, tensioactivos de éter de poliglicol no iónicos tipo NP-7 [10]
- Varias técnicas de tinción de esporas bacterianas utilizando Kenyon, p. Ej.
- Mancha fina [11]
- Tinción de Ellis y Zabrowarny [15] [16] (sin fenol / ácido carbólico)
- Tinción de auramina-rodamina
- Tinción de auramina fenol
Estructuras acidorresistentes notables
Muy pocas estructuras son resistentes a los ácidos; esto hace que la tinción para la resistencia al ácido sea particularmente útil en el diagnóstico. Los siguientes son ejemplos notables de estructuras que son resistentes a los ácidos o resistentes a los ácidos modificados:
- Todas las micobacterias : M. tuberculosis , M. leprae , M. smegmatis y Mycobacterium atípico
- Actinomicetos (especialmente algunos aeróbicos) con ácido micólico en su pared celular (tenga en cuenta que los Streptomyces NO lo tienen); no confundir con Actinomyces , que es un género de actinomicetos no acidorresistente
- Nocardia (débilmente resistente al ácido; resiste la decoloración con concentraciones de ácido más débiles)
- Rhodococcus
- Gordonia (un actinomiceto)
- Tsukamurella
- Dietzia
- Cabeza de esperma
- Esporas bacterianas, ver Endospora
- Legionella micdadei
- Ciertas inclusiones celulares, p. Ej.
- Cuerpos de inclusión citoplasmáticos vistos en
- Neuronas en la capa 5 de la lipofuscinosis ceroide neuronal de la corteza cerebral ( enfermedad de Batten ).
- Cuerpos de inclusión nuclear vistos en
- Envenenamiento por plomo
- Envenenamiento por bismuto.
- Cuerpos de inclusión citoplasmáticos vistos en
- Ooquistes de algunos parásitos coccidianos en materia fecal, como:
- Cryptosporidium parvum , [17]
- Isospora belli [18]
- Cyclospora cayetanensis . [19]
- Algunos otros parásitos:
- Sarcocystis
- Los huevos de Taenia saginata se tiñen bien, pero loshuevos de Taenia solium no (se pueden usar para distinguir)
- Los quistes hidatídicos , especialmente sus " ganchos ", se tiñen irregularmente con tinción de ZN pero emanan una fluorescencia roja brillante bajo luz verde y pueden ayudar a la detección en fondos moderadamente pesados o con escasos ganchos. [20]
- Las formas de levadura fúngica se tiñen de manera inconsistente con la tinción acidorresistente que se considera una tinción de espectro estrecho para los hongos. [21] En un estudio sobre la resistencia a los ácidos de los hongos, [22] 60% de blastomyces y 47% de histoplasma mostraron tinción citoplasmática positiva de las células similares a levaduras, y Cryptococcus o candida no se tiñeron, y se observó tinción muy rara. en endosporas de Coccidioides.
Referencias
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- ^ Reynolds, Jackie; Moyes, Rita B .; Breakwell, Donald P. (noviembre de 2009). "Tinción diferencial de bacterias: tinción ácido-resistente". Protocolos actuales en microbiología . Apéndice 3: Apéndice 3H. doi : 10.1002 / 9780471729259.mca03hs15 . ISSN 1934-8533 . PMID 19885935 . S2CID 45685776 .
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- ^ Teoría y práctica de técnicas histológicas, John D Bancroft, 6a ed, p314
- ^ Dorner, W. 1926. Un procedimiento simple para la coloración de las esporas. Le Lait 6: 8-12.
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- ^ Salarios ds, desgaste dJ. resistencia a los ácidos de los hongos en blastomicosis e histoplasmosis. Arch Pathol Lab Med 1982; 106: 440-41.
Ejemplos de protocolos en línea
- Protocolo de Ziehl – Neelsen ( formato PDF ).
- Método alternativo de Ellis & Zabrowarny para teñir AFB.