El verde de metilo (CI 42585) es una tinción catiónica o cargada positiva , relacionada con Ethyl Green , que se ha utilizado para teñir el ADN desde el siglo XIX. [1] Se ha utilizado para teñir núcleos celulares como parte de la tinción clásica de Unna-Pappenheim o como contratinción nuclear desde entonces. En los últimos años, sus propiedades fluorescentes [2] cuando se une al ADN lo han posicionado como útil para la obtención de imágenes en rojo lejano de núcleos de células vivas. [3] La tinción de ADN fluorescente se usa de forma rutinaria en el pronóstico del cáncer. [4]
El verde de metilo también surge como una tinción alternativa para el ADN en geles de agarosa , ensayos fluorométricos y citometría de flujo . [3] [5] También se ha demostrado que se puede utilizar como tinción de viabilidad de exclusión para células. Se ha demostrado que su interacción con el ADN no se intercala , es decir, que no se inserta en el ADN, sino que es electrostática con el surco principal del ADN . [6] Se utiliza en combinación con pironina en la tinción de verde de metilo-pironina que tiñe y diferencia el ADN y el ARN.
Identificadores | |
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Número CAS |
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PubChem CID | |
UNII | |
Tablero CompTox ( EPA ) | |
Tarjeta de información ECHA | 100.001.316 |
Datos químicos y físicos | |
Fórmula | C 27 H 35 Cl 2 N 3 |
Masa molar | 458,47 |
Cuando se excita a 244 o 388 nm en una solución acuosa neutra, el verde de metilo produce una emisión fluorescente a 488 o 633 nm respectivamente. La presencia o ausencia de ADN no afecta estos comportamientos de fluorescencia. Cuando se une al ADN en condiciones acuosas neutras, el verde de metilo también se vuelve fluorescente en el rojo lejano con un máximo de excitación de 633 nm y un máximo de emisión de 677 nm. [3]
Las preparaciones comerciales de verde de metilo a menudo están contaminadas con violeta cristal . El cristal violeta se puede eliminar mediante extracción con cloroformo . [3]
Referencias
- ^ Carnoy JB (1884). La biologie cellulaire, étude comparée de la cellule dans les deux règnes / par le chanoine JB Carnoy ... Bibliothèque nationale de France, departamento de Ciencias y Técnicas, 8-S-6259: J. Van In. pag. 148 . Consultado el 3 de noviembre de 2017 .Mantenimiento de CS1: ubicación ( enlace )
- ^ "fluorophores.org" . www.fluorophores.tugraz.at . Consultado el 8 de agosto de 2016 .
- ^ a b c d Prieto D, Aparicio G, Morande PE, Zolessi FR (septiembre de 2014). "Un método de etiquetado de ADN fluorescente rápido, de bajo costo y altamente eficiente que utiliza verde de metilo". Histoquímica y Biología Celular . 142 (3): 335–45. doi : 10.1007 / s00418-014-1215-0 . PMID 24671497 . S2CID 11094194 .
- ^ Klonisch T, Wark L, Hombach-Klonisch S, Mai S (septiembre de 2010). "Imagen nuclear en tres dimensiones: una herramienta única en la investigación del cáncer". Annals of Anatomy - Anatomischer Anzeiger . 192 (5): 292-301. doi : 10.1016 / j.aanat.2010.07.007 . PMID 20800459 .
- ^ Prieto D, Aparicio G, Machado M, Zolessi FR (mayo de 2015). "Aplicación de la tinción de verde de metilo específico de ADN en el marcaje fluorescente de embriones" . Revista de experimentos visualizados (99): e52769. doi : 10.3791 / 52769 . PMC 4542129 . PMID 25993383 .
- ^ Kim SK, Nordén B (enero de 1993). "Verde de metilo. Un fármaco de unión al ADN de la ranura principal" . Cartas FEBS . 315 (1): 61–4. doi : 10.1016 / 0014-5793 (93) 81133-K . PMID 8416812 .