Rojo de quinaldina
El rojo de quinaldina (pronunciado / ˈ k w ɪ n əl d iː n / , abreviado QR) [3] es un sólido verde-rojo oscuro o negro que no se disuelve fácilmente en agua (es parcialmente miscible). [4] Además de usarse como indicador de color, el rojo de quinaldina también se usa como sonda de fluorescencia y agente blanqueador.
El rojo de quinaldina es un indicador que cambia de incoloro a rojo entre un pH de 1,0 a 2,2. [5] La siguiente imagen muestra el color que tendría el rojo de quinaldina en un pH determinado.
Es una molécula catiónica que sufre oxidación a diferentes niveles de pH. [3] La velocidad de oxidación del rojo de Quinaldina es de primer orden con respecto a la concentración del agente oxidante. [3] Otros factores que aumentan la tasa de oxidación incluyen el aumento del pH y el aumento de la concentración de carbonato de sodio . La velocidad de reacción eventualmente se estabiliza debido a la máxima formación del producto dentro del proceso de oxidación.
El rojo de quinaldina también tiene la capacidad de emitir fluorescencia . El rojo de quinaldina libre no emite fluorescencia en solución cuando no está unido a nada, lo que hace que el rojo de quinaldina solo sea visible por fluorescencia cuando está unido a algo. El rojo de quinaldina puede exhibir fluorescencia cuando se une a ácidos nucleicos , que luego emiten radiación entre 580 y 650 nm.[6]La fluorescencia máxima de QR se detecta de 557 nm a 607 nm. QR y los ácidos nucleicos reaccionan rápidamente a temperatura ambiente, y el complejo QR-ácido nucleico resultante es capaz de emitir fluorescencia. Sin embargo, la actividad fluorescente disminuye a medida que pasa el tiempo. La fluorescencia máxima entre QR y ADN se encuentra dentro del rango de pH de 3,2-3,6, siendo el óptimo un pH de 3,5. La cantidad de fluorescencia observada con el uso de QR está linealmente relacionada con las concentraciones de ADN o ARN.
El QR se sintetiza mediante una reacción de condensación entre el grupo metilo del yoduro de 1-etil-2-metilquinolinio y el carbonilo del para - dimetilaminobenzaldehído . [7] [ cita completa necesaria ]
QR tiene muchos usos como sonda fluorescente. El uso de QR como sonda es un método relativamente seguro, económico y sensible en comparación con otras sondas de fluorescencia como el bromuro de etidio o los colorantes de cianina dimérica . [6] QR también es una sonda fluorescente ideal porque los sustratos de interés, como los anticuerpos, se pueden detectar dentro de un límite de detección de 0,3 nM sin el uso de oligonucleótidos marcados con fluorescencia o radiomarcados , que son los componentes del ADN. En otras palabras, el rojo de quinaldina es la etiqueta preferida ya que su unión aumenta la fluorescencia sin que se necesiten etiquetas adicionales. [8]
