Fago T7
El bacteriófago T7 (o el fago T7 ) es un bacteriófago , un virus que infecta a las bacterias. Infecta a la mayoría de las cepas de Escherichia coli y depende de estos huéspedes para propagarse. El bacteriófago T7 tiene un ciclo de vida lítico , lo que significa que destruye la célula que infecta. También posee varias propiedades que lo convierten en un fago ideal para la experimentación: su purificación y concentración han producido valores consistentes en análisis químicos; [2] puede volverse no infeccioso por exposición a la luz ultravioleta; [3] y se puede utilizar en la presentación de fagos para clonar proteínas de unión a ARN . [3]
En un estudio de 1945 de Demerec y Fano, [4] T7 se utilizó para describir uno de los siete tipos de fagos (T1 a T7) que crecen líticamente en Escherichia coli; [5] aunque los siete fagos se numeraron arbitrariamente, más tarde se descubrió que los fagos con números impares, o fagos T-impares, compartían características morfológicas y bioquímicas que los distinguen de los fagos T-pares. [6] Antes de ser referido físicamente como T7, el fago se utilizó en experimentos anteriores. El biofísico germano-estadounidense Max Delbrück trabajó con el mismo virus a fines de la década de 1930, llamándolo fago δ, y el microbiólogo franco-canadiense Félix d'Herelle probablemente estudió a su pariente cercano en la década de 1920. [7] [5]
La T7 crece en cepas rugosas de Escherichia coli (es decir, aquellas sin polisacárido de antígeno O de longitud completa en su superficie) y algunas otras bacterias entéricas , pero parientes cercanos también infectan cepas lisas e incluso encapsuladas. [8] E. coli es más resistente a T7 que a algunos otros fagos similares.
El virus tiene una simetría estructural compleja, con una cápside del fago que es icosaédrica (veinte caras) con un diámetro interno de 55 nm y una cola de 19 nm de diámetro y 28,5 nm de longitud unida a la cápside. [9] La expulsión de proteínas de la cápside tras la infección hace que el virus cambie de estructura cuando ingresa a la célula. [10]
El genoma del fago T7 [11] fue uno de los primeros genomas completamente secuenciados y fue publicado en 1983. [12] La cabeza de la partícula del fago contiene aproximadamente 40 kpb del genoma de dsDNA que codifica 55 proteínas. [13] El genoma presenta numerosos genes superpuestos [14] que fueron eliminados parcialmente mediante la "refactorización" del genoma para producir T7.1. [15]
T7 tiene un ciclo de vida de 17 min a 37ºC, es decir, el tiempo desde la infección hasta la lisis de la célula huésped cuando se liberan nuevos fagos. Debido al corto período de latencia , la mayoría de los estudios fisiológicos se realizan a 30 ° C, donde las células infectadas se lisan después de 30 min. Sin embargo, se han aislado cepas de T7 de alta aptitud con un período de latencia de solo ~ 11 min a 37 ° C creciendo en condiciones óptimas en resultados de medios enriquecidos. Este fago adaptado puede experimentar una expansión efectiva de su población en más de 10 13 en una hora de crecimiento. [17]
