El destecho celular es cualquiera de varios métodos para aislar y exponer la membrana celular de las células . A diferencia de los protocolos de extracción de membrana más comunes realizados con múltiples pasos de centrifugación (cuyo objetivo es separar la fracción de membrana de un lisado celular ), en el destechamiento celular el objetivo es rasgar y preservar parches de la membrana plasmática para realizar in situ experimentos utilizando (microscopía y espectroscopía biomédica ).
Historia
La primera observación de la membrana celular de dos capas se realizó en 1959 [1] en una sección de una célula utilizando el microscopio electrónico. Pero la primera micrografía del lado interno de una célula se remonta a 1977 [2] por MV Nermut. El profesor John Heuser hizo contribuciones sustanciales en el campo, obteniendo imágenes de la estructura interna detallada de la membrana y el citoesqueleto unido a ella con el uso extensivo del microscopio electrónico.
Fue sólo después del desarrollo del microscopio de fuerza atómica operado en líquido que fue posible obtener imágenes de las membranas celulares en condiciones casi fisiológicas [3] y probar sus propiedades mecánicas. [4]
Métodos
- Fractura por congelación de monocapas [5]
- Microscopía electrónica de grabado profundo y congelación rápida y criofijación [6]
- Sonicación para microscopía de fuerza atómica [7]
- Destecho de una celda [4]
Ver también
Referencias
- ^ Robertson, JD (1959). "La ultraestructura de las membranas celulares y sus derivados". Biochem. Soc. Symp .
- ^ Nermut, MV; Williams, Lynn D. (1977). "Fractura por congelación de monocapas (capas capilares) de células, membranas y virus: algunas consideraciones técnicas". Revista de microscopía . 110 (2): 121-132. doi : 10.1111 / j.1365-2818.1977.tb00023.x . ISSN 1365-2818 . PMID 335072 .
- ^ Cho, Sang-Joon; Ahn, Jeonghun; Youn, Daehwan; Minakata, Shiho; Yoshimura, Azumi; Usukura, Jiro (1 de octubre de 2012). "Utilización de la técnica de destechamiento de imagen microscópica de fuerza atómica del citoesqueleto intracelular en condiciones acuosas" . Revista de microscopía electrónica . 61 (5): 321–326. doi : 10.1093 / jmicro / dfs055 . ISSN 0022-0744 . PMID 22872282 .
- ^ a b Galvanetto, Nicola (1 de diciembre de 2018). "Destecho unicelular: topología de sondeo y nanomecánica de membranas nativas". Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Biomembranas . 1860 (12): 2532-2538. arXiv : 1810.01643 . doi : 10.1016 / j.bbamem.2018.09.019 . ISSN 0005-2736 . PMID 30273580 .
- ^ Nermut, MV; Williams, Lynn D. (1977). "Fractura por congelación de monocapas (capas capilares) de células, membranas y virus: algunas consideraciones técnicas". Revista de microscopía . 110 (2): 121-132. doi : 10.1111 / j.1365-2818.1977.tb00023.x . ISSN 1365-2818 . PMID 335072 .
- ^ Heuser, John (2000). "La producción de 'cortices celulares' para microscopía óptica y electrónica" . Tráfico . 1 (7): 545–552. doi : 10.1034 / j.1600-0854.2000.010704.x . ISSN 1600-0854 . PMID 11208142 .
- ^ Usukura, Jiro; Ito, Shuichi; Yagi, Akira; Narita, Akihiro; Usukura, Eiji (7 de junio de 2016). "Un método de quitar el techo para observar el citoesqueleto directamente en resolución molecular utilizando microscopía de fuerza atómica" . Informes científicos . 6 : 27472. doi : 10.1038 / srep27472 . ISSN 2045-2322 . PMC 4895337 . PMID 27273367 .