La prueba de citrato detecta la capacidad de un organismo para utilizar citrato como única fuente de carbono y energía.
Principio
Las bacterias se inoculan en un medio que contiene citrato de sodio y un indicador de pH como el azul de bromotimol . El medio también contiene sales de amonio inorgánicas, que se utilizan como única fuente de nitrógeno. El uso de citrato implica la enzima citrasa , que descompone el citrato en oxaloacetato y acetato . El oxaloacetato se descompone en piruvato y dióxido de carbono (CO 2 ). Producción de bicarbonato de sodio (NaHCO 3 ) y amoniaco (NH 3) del uso de citrato de sodio y sales de amonio da como resultado un pH alcalino. Esto da como resultado un cambio del color del medio de verde a azul.
Las colonias bacterianas se recogen de un alambre recto y se inoculan en una pendiente de agar citrato de Simmons y se incuban durante la noche a 37 ° C. Si el organismo tiene la capacidad de utilizar citrato, el medio cambia su color de verde a azul.
Ejemplos:
- Escherichia coli : negativo
- Klebsiella pneumoniae : Positivo
- Frateuria aurantia : Positiva
Método
Inocular agar citrato Simmons (no inocular demasiado) usando alambre recto de una colonia de 18 a 24 horas de edad. No se recomienda la inoculación de un cultivo en caldo porque el inóculo sería demasiado pesado. Incubar a 35 ° C hasta por siete días.
Resultados
Positivo: el crecimiento en el medio incluso sin cambio de color se considerará positivo. [1] Se observará un cambio de color en el medio si el organismo de prueba produce ácido o álcali durante su crecimiento. El cambio de color habitual observado es de verde (neutro) a azul (alcalino).
Negativo: No se observó crecimiento.
Referencias
- ^ A. Forbes, Betty; Daniel F. Sahm; Alice S. Weissfeld (1998). Microbiología diagnóstica de BAILEY & SCOTT (décima ed.). Don Ladig. pag. 430 . ISBN 0-8151-2535-6.