Enzima inmovilizada
Una enzima inmovilizada es una enzima unida a un material inerte e insoluble, como el alginato de calcio (que se produce al hacer reaccionar una mezcla de solución de alginato de sodio y solución de enzima con cloruro de calcio ). Esto puede proporcionar una mayor resistencia a cambios en condiciones como el pH o la temperatura . También permite que las enzimas se mantengan en su lugar durante toda la reacción, después de lo cual se separan fácilmente de los productos y se pueden usar nuevamente, un proceso mucho más eficiente y, por lo tanto, se usa ampliamente en la industria para reacciones catalizadas por enzimas . Una alternativa a la inmovilización enzimática es inmovilización de células completas . [1] [2]
Las enzimas inmovilizadas son muy importantes para usos comerciales ya que poseen muchos beneficios para los gastos y procesos de reacción de los cuales se incluyen:
En el pasado, los detergentes y polvos de lavado biológicos contenían muchas proteasas y lipasas que descomponían la suciedad. Sin embargo, cuando los productos de limpieza entraron en contacto con la piel humana, crearon reacciones alérgicas. Por eso la inmovilización de enzimas es importante, no solo económicamente.
Se han inmovilizado numerosas enzimas de importancia biotecnológica sobre diversos soportes (inorgánicos, orgánicos, compuestos y nanomateriales) mediante fijación multipunto aleatoria. Sin embargo, la inmovilización mediante modificación química aleatoria da como resultado una población de proteínas heterogénea en la que más de una cadena lateral (amino, carboxilo, tiol, etc.) presentes en las proteínas están vinculadas con el soporte con una posible reducción de la actividad debido a la restricción del acceso del sustrato al sitio activo. . [6]
Por el contrario, en la inmovilización enzimática dirigida al sitio, el soporte se puede unir a un único aminoácido específico (generalmente los extremos N o C) en una molécula de proteína alejada del sitio activo. De esta manera, se retiene la máxima actividad enzimática debido al libre acceso del sustrato al sitio activo. Estas estrategias son principalmente químicas, pero además pueden requerir métodos genéticos y enzimáticos para generar grupos funcionales (que están ausentes en las proteínas) sobre el soporte y la enzima.
La elección del método SDCM depende de muchos factores, como el tipo de enzima (homólogo psicrófilo menos estable o termófilo más estable), la estabilidad del pH de la enzima, la disponibilidad de los terminales N o C para el reactivo, la no interferencia de el término enzimático con la actividad enzimática, el tipo de residuo de aminoácido catalítico, la disponibilidad, el precio y la facilidad de preparación de los reactivos. Por ejemplo, la generación de funcionalidades complementarias en las que se puede hacer clic (alquino
