Una proteína fluorescente modificada genéticamente que cambia su fluorescencia cuando se une al neurotransmisor glutamato . Los indicadores fluorescentes sensibles al glutamato (GluSnFR, coloquialmente pronunciado " sniffer de pegamento ") se utilizan para controlar la actividad de las terminales presinápticas mediante microscopía de fluorescencia . Los GluSnFR son una clase de sensores optogenéticos que se utilizan en la investigación de la neurociencia . [1] En el tejido cerebral, la microscopía de dos fotones se usa típicamente para monitorear la fluorescencia de GluSnFR.
El iGluSnFR ampliamente utilizado consiste en una proteína fluorescente verde mejorada permutada circularmente (cpEGFP) fusionada con una proteína de unión a glutamato (GluBP) de una bacteria . [2] Cuando GluBP se une a una molécula de glutamato , cambia su forma, juntando el cilindro de EGFP , aumentando la fluorescencia. Se incluye un segmento peptídico específico ( PDGFR ) para llevar el sensor al exterior de la membrana celular . [3]
Los primeros sensores de glutamato fluorescente codificados genéticamente (FLIPE, GluSnFR y SuperGluSnFR) se construyeron uniendo proteína fluorescente cian (CFP) y proteína fluorescente amarilla (YFP) a una proteína de unión a glutamato bacteriana (GluBP). [4] [5] La unión del glutamato cambió la distancia entre CFP y YFP, cambiando la eficiencia de la transferencia de energía ( FRET ) entre los dos fluoróforos . [6] [7] Se logró un gran avance en la visualización de la liberación de glutamato con iGluSnFR, un sensor de glutamato de un solo fluoróforo basado en EGFP que produce un aumento de ~ 5 veces en la fluorescencia. [2]Para medir la transmisión sináptica a altas frecuencias, recientemente se han desarrollado nuevas variantes de iGluSnFR con cinética acelerada. [8] [9]