MTSL ( S - (1-oxil-2,2,5,5-tetrametil-2,5-dihidro-1H-pirrol-3-il) metil metanosulfonotioato) es un compuesto de azufre orgánico que se utiliza como etiqueta de giro de nitróxido . [1] MTSL es bifuncional y consta de los grupos funcionales nitróxido y éster tiosulfonato . La etiqueta de nitróxido está protegida estéricamente, por lo que es relativamente poco reactiva.
MTSL se une a proteínas por reacción con grupos tiol. La reacción aprovecha la reactividad estándar de los ésteres de tiosulfato. El ácido sulfínico (CH 3 SO 2 H) es el grupo saliente:
El enlace heterodisulfuro al residuo de cisteína es robusto, lo que permite el etiquetado de espín dirigido al sitio. [2] [3] El resto MTSL agregará 184,3 dalton a la masa de la proteína o péptido al que está unido. La cisteína se puede introducir usando mutagénesis dirigida al sitio y, por lo tanto, se pueden marcar la mayoría de las posiciones en una proteína.
En la resonancia magnética nuclear, la introducción del grupo paramagnético aumenta la tasa de relajación de los núcleos cercanos . [1] Su presencia puede detectarse como ensanchamiento de picos y pérdida de intensidad en picos correspondientes a núcleos cercanos. Por tanto, se puede inferir la proximidad de todos los núcleos afectados. Una ventaja importante de este método sobre los métodos tradicionales para obtener restricciones de distancia en la RMN de proteínas es la mayor longitud, ya que la mejora de la relajación paramagnética puede detectar distancias de hasta 25 Å (2,5 nm ) en lugar de aproximadamente 6 Å (0,6 nm) utilizando el Overhauser nuclear. efecto . El etiquetado giratorio con MTSL se utiliza con frecuencia en la investigación de la estructura residual enproteínas intrínsecamente no estructuradas .