La clasificación de células activadas magnéticamente (MACS) es un método para la separación de varias poblaciones de células en función de sus antígenos de superficie ( moléculas CD ) inventado por Miltenyi Biotec . El nombre MACS es una marca registrada de la empresa.
El método se desarrolló con el sistema MACS de Miltenyi Biotec, que utiliza nanopartículas y columnas superparamagnéticas . Las nanopartículas superparamagnéticas son del orden de 100 nm. Se utilizan para etiquetar las celdas objetivo con el fin de capturarlas dentro de la columna. La columna se coloca entre imanes permanentes para que cuando el complejo de partículas magnéticas-celda pase a través de ella, las células etiquetadas puedan ser capturadas. La columna consta de lana de acero que aumenta el gradiente del campo magnético para maximizar la eficiencia de separación cuando la columna se coloca entre los imanes permanentes.
La clasificación de células activadas magnéticamente es un método de uso común en áreas como la inmunología, la investigación del cáncer, la neurociencia y la investigación con células madre. Miltenyi vende microperlas que son nanopartículas magnéticas conjugadas con anticuerpos que pueden usarse para atacar células específicas.
Procedimiento
El método MACS permite separar las células mediante el uso de nanopartículas magnéticas recubiertas con anticuerpos contra un antígeno de superficie particular. Esto hace que las células que expresan este antígeno se adhieran a las nanopartículas magnéticas. Después de incubar las perlas y las células, la solución se transfiere a una columna en un campo magnético fuerte. En este paso, las células unidas a las nanopartículas (que expresan el antígeno) permanecen en la columna, mientras que otras células (que no expresan el antígeno) fluyen. Con este método, las células se pueden separar positiva o negativamente con respecto al antígeno o antígenos particulares. [ cita requerida ]
Selección positiva y negativa
Con la selección positiva, las células que expresan el (los) antígeno (s) de interés, que se unieron a la columna magnética, se lavan en un recipiente separado, después de retirar la columna del campo magnético. Este método es útil para el aislamiento de un tipo de célula particular, por ejemplo, linfocitos CD4 .
Con selección negativa, el anticuerpo usado es contra el (los) antígeno (s) de superficie que se sabe que están presentes en células que no son de interés. Después de la administración de la solución de células / nanopartículas magnéticas en la columna, las células que expresan estos antígenos se unen a la columna y se recoge la fracción que atraviesa, ya que casi no contiene células con estos antígenos no deseados.
Modificaciones
Las nanopartículas magnéticas conjugadas con un anticuerpo contra un antígeno de interés no siempre están disponibles, pero hay una forma de evitarlo. Dado que los anticuerpos conjugados con fluoróforos son mucho más frecuentes, es posible utilizar nanopartículas magnéticas recubiertas con anticuerpos anti-fluorocromo. Se incuban con los anticuerpos marcados con fluorescencia contra el antígeno de interés y, por tanto, pueden servir para la separación celular con respecto al antígeno. [ cita requerida ]
Ver también
Referencias
- S. Miltenyi, W. Muller, W. Weichel y A. Radbruch, "Separación de células magnéticas de alto gradiente con MACS", Citometría. Vol. 11, no. 2, págs. 231-238, 1990.