Marcador de linaje neuronal


Un marcador de linaje neuronal es una etiqueta endógena que se expresa en diferentes células a lo largo de la neurogénesis y en células diferenciadas como las neuronas . Permite la detección e identificación de células mediante el uso de diferentes técnicas. Un marcador de linaje neuronal puede ser ADN, ARNm o ARN expresado en una célula de interés. También puede ser una etiqueta de proteína , como una proteína parcial, una proteína o un epítopo.que discrimina entre diferentes tipos de células o diferentes estados de una célula común. Un marcador ideal es específico para un tipo de célula dado en condiciones normales y / o durante una lesión. Los marcadores celulares son herramientas muy valiosas para examinar la función de las células en condiciones normales, así como durante la enfermedad. El descubrimiento de varias proteínas específicas de ciertas células condujo a la producción de anticuerpos específicos del tipo de célula que se han utilizado para identificar células. [1]

Las técnicas utilizadas para su detección pueden ser inmunohistoquímica , inmunocitoquímica , métodos que utilizan moduladores transcripcionales y recombinasas específicas de sitio para marcar una población neuronal específica, [2] hibridación in situ o hibridación fluorescente in situ (FISH). [3] Un marcador de linaje neuronal puede ser un antígeno neuronal que es reconocido por un autoanticuerpo, por ejemplo , Hu , que está muy restringido a los núcleos neuronales. Por inmunohistoquímica, anti-Hu tiñe los núcleos de las neuronas. [4] Para localizar el ARNm en el tejido cerebral, se puede usar un fragmento de ADN o ARN como marcador de linaje neuronal, una sonda de hibridaciónque detecta la presencia de secuencias de nucleótidos que son complementarias a la secuencia en la sonda. Esta técnica se conoce como hibridación in situ . Su aplicación se ha llevado a cabo en todos los diferentes tejidos, pero especialmente útil en neurociencia . Con esta técnica, es posible localizar la expresión génica en tipos de células específicos en regiones específicas y observar cómo ocurren los cambios en esta distribución a lo largo del desarrollo y se correlacionan con las manipulaciones del comportamiento. [5]

Aunque la inmunohistoquímica es la metodología básica para identificar los tipos de células neuronales, dado que tiene un costo relativamente bajo y se encuentra disponible una amplia gama de marcadores inmunohistoquímicos para ayudar a distinguir el fenotipo de las células en el cerebro, a veces lleva mucho tiempo producir un buen anticuerpo . [6] Por lo tanto, uno de los métodos más convenientes para la evaluación rápida de la expresión de un canal iónico clonado podría ser la histoquímica de hibridación in situ.

Después de aislar las células del tejido o diferenciarlas de los precursores pluripotentes , es necesario caracterizar la población resultante para confirmar si se ha obtenido la población objetivo. Dependiendo del objetivo de un estudio particular, se pueden utilizar células madre neurales marcadores, neuronales de células progenitoras marcadores, neuronas marcadores o SNP marcadores neuronales.


Ejemplos de marcadores que se expresan en diferentes etapas de neurogénesis en hipocampo adulto.
Hibridación in situ de ARN - KRT5 y gen de mantenimiento en una sección de tejido FFPE de melanoma humano - visualizada bajo un microscopio de campo claro y de fluorescencia
Corte de cerebro de ratón teñido por inmunohistoquímica.