Un instrumento de PCR cuantitativa [1] es una máquina que amplifica y detecta ADN . Combina las funciones de un termociclador y un fluorímetro , permitiendo el proceso de PCR cuantitativa .
La primera máquina de PCR cuantitativa se describió en 1993, [2] y dos modelos comerciales estuvieron disponibles en 1996. En 2009, siete fabricantes diferentes ofrecían dieciocho modelos diferentes. [3] Los precios oscilan entre 4300 USD [4] y 150 000 USD [5]
Las principales dimensiones de rendimiento de los instrumentos de PCR cuantitativa son el control térmico, la fluorimetría y el rendimiento de la muestra.
Se han demostrado 30 ciclos de PCR en menos de 10 minutos. [6] El ciclo rápido proporciona varios beneficios, que incluyen un tiempo reducido para obtener el resultado, un mayor rendimiento del sistema y una mejor especificidad de la reacción. [7] Sin embargo, en la práctica, las compensaciones de ingeniería entre facilidad de uso, uniformidad de temperatura y velocidad significan que los tiempos de reacción son típicamente de más de 25 minutos. [3]
La falta de uniformidad térmica durante los ciclos de temperatura contribuye a la variabilidad en la PCR [8] [9] [10] y, desafortunadamente, algunos termocicladores no cumplen las especificaciones declaradas por los fabricantes. [11] El aumento de la velocidad de los ciclos térmicos generalmente reduce la uniformidad térmica y puede reducir la precisión de la PCR cuantitativa . [12]
La uniformidad de la temperatura también tiene un efecto directo sobre la capacidad de discriminar diferentes productos de PCR mediante la realización de análisis del punto de fusión. [13] Además de la uniformidad, la resolución con la que los instrumentos pueden controlar la temperatura es un factor que afecta su rendimiento cuando se realizan análisis de fusión de alta resolución . [14]