La preparación de corte o corte de cerebro es una técnica de laboratorio en electrofisiología que permite el estudio de una sinapsis o circuito neural de forma aislada del resto del cerebro, en condiciones fisiológicas controladas. El tejido cerebral se corta inicialmente a través de un cortador de tejido y luego se sumerge en líquido cefalorraquídeo artificial (aCSF) para su estimulación y / o registro. La técnica permite un mayor control experimental , mediante la eliminación de los efectos del resto del cerebro sobre el circuito de interés, un control cuidadoso de las condiciones fisiológicas mediante la perfusión de sustratos a través dellíquido de incubación , para la manipulación precisa de la actividad de los neurotransmisores mediante la perfusión de agonistas y antagonistas . Sin embargo, el aumento en el control viene con una disminución en la facilidad con la que los resultados se pueden aplicar a todo el sistema neuronal.
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Beneficios y limitaciones
Cuando se investiga la actividad del SNC de mamíferos, la preparación de cortes tiene varias ventajas y desventajas en comparación con el estudio in vivo. La preparación de rodajas es más rápida y económica que la preparación in vivo y no requiere anestesia más allá del sacrificio inicial. La eliminación del tejido cerebral del cuerpo elimina los efectos mecánicos de los latidos del corazón y la respiración , lo que permite un registro intracelular extendido . Las condiciones fisiológicas de la muestra, como los niveles de oxígeno y dióxido de carbono, o el pH del líquido extracelular se pueden ajustar y mantener cuidadosamente. El trabajo de corte bajo un microscopio también permite la colocación cuidadosa del electrodo de registro, lo que no sería posible en el sistema cerrado in vivo. La extracción del tejido cerebral significa que no existe una barrera hematoencefálica , lo que permite que los medicamentos, los neurotransmisores o sus moduladores , o los iones se perfunden por todo el tejido neural. Finalmente, mientras que el circuito aislado en un corte de cerebro representa un modelo simplificado del circuito in situ , mantiene conexiones estructurales que se pierden en cultivos celulares o tejido homogeneizado .
Sin embargo, la preparación de las rebanadas también tiene algunos inconvenientes. Lo más obvio es que un segmento aislado carece de las conexiones habituales de entrada y salida presentes en todo el cerebro. Además, el propio proceso de corte puede comprometer el tejido. Para minimizar las complicaciones en el proceso de corte, se puede utilizar un cortador de tejido más sofisticado, como el Compresstome, un tipo de micrótomo vibratorio que se utiliza para maximizar la cantidad de células de tejido viables [1] . Además, cortar el cerebro puede dañar la parte superior e inferior de la sección, pero más allá de eso, el proceso de decapitación y extracción del cerebro antes de colocar la rebanada en la solución puede tener efectos en el tejido que aún no se comprenden. Durante la grabación, el tejido también "envejece", degradándose a un ritmo más rápido que en el animal intacto. Finalmente, la composición artificial de la solución de baño significa que la presencia y concentraciones relativas de los compuestos necesarios pueden no estar presentes.
Referencias
- Schurr, Avital, Preparación de cortes de cerebro en electrofisiología , Kopf Carrier , Vol 15
- ^ "Instrumentos de precisión: Compresstome" . www.precisionary.com . Consultado el 6 de septiembre de 2016 .