La microscopía de superresolución es una serie de técnicas en microscopía óptica que permiten que dichas imágenes tengan resoluciones superiores a las impuestas por el límite de difracción , [1] [2] que se debe a la difracción de la luz . [3] Las técnicas de obtención de imágenes de superresolución se basan en el campo cercano (microscopía de túnel de fotones [4] , así como en las que utilizan el Pendry Superlens y la microscopía óptica de barrido de campo cercano ) o en el campo lejano. Entre las técnicas que se basan en este último se encuentran aquellas que mejoran la resolución solo modestamente (hasta aproximadamente un factor de dos) más allá del límite de difracción, como la microscopía confocal con orificio de alfiler cerrado o con la ayuda de métodos computacionales como la deconvolución [5] o el detector. -reasignación de píxeles basada en (por ejemplo, microscopía de nuevo escaneo, [6] reasignación de píxeles [7] ), el microscopio 4Pi y tecnologías de microscopía de iluminación estructurada como SIM y SMI .
Hay dos grupos principales de métodos para microscopía de superresolución en el campo lejano que pueden mejorar la resolución en un factor mucho mayor: [8]
El 8 de octubre de 2014, se otorgó el Premio Nobel de Química a Eric Betzig , WE Moerner y Stefan Hell por "el desarrollo de la microscopía de fluorescencia súper resuelta ", que lleva " la microscopía óptica a la nanodimensión ". [9] [10] Las diferentes modalidades de microscopía de superresolución están siendo adoptadas cada vez más por la comunidad de investigación biomédica, y estas técnicas se están convirtiendo en herramientas indispensables para comprender la función biológica a nivel molecular. [11]
En 1978, se habían desarrollado las primeras ideas teóricas para romper el límite de Abbe , que requería el uso de un microscopio 4Pi como microscopio de fluorescencia de escaneo láser confocal donde la luz se enfoca desde todos los lados hacia un foco común que se usa para escanear el objeto. por excitación 'punto por punto' combinada con detección 'punto por punto'. [12] Sin embargo, la publicación de 1978 [13] había extraído una conclusión física inadecuada (es decir, un punto de luz puntual) y había pasado por alto por completo el aumento de resolución axial como el beneficio real de agregar el otro lado del ángulo sólido. [14]
Parte de la siguiente información se recopiló (con permiso) de la revisión de un blog de química de las técnicas de microscopía de sub-difracción. [15] [16]
En 1986, Okhonin patentó un microscopio óptico de superresolución basado en emisión estimulada. [17]