La tinción tricrómica es un método de tinción histológica que utiliza dos o más tintes ácidos junto con un poliácido . La tinción diferencia los tejidos al teñirlos con colores contrastantes. Aumenta el contraste de las características microscópicas en células y tejidos , lo que los hace más fáciles de ver cuando se observan a través de un microscopio .
La palabra tricrómico significa "tres colores". El primer protocolo de tinción que se describió como "tricrómico" fue la tinción tricrómica de Mallory , que tiñó diferencialmente los eritrocitos a un color rojo, el tejido muscular a un color rojo y el colágeno a un color azul. Algunos otros protocolos de tinción tricrómica son la tinción de tricrómico de Masson , tricrómico de Lillie , y el Gömöri tricrómico .
Sin la tinción tricrómica, distinguir una característica de otra puede ser extremadamente difícil. El tejido muscular liso , por ejemplo, es difícil de diferenciar del colágeno. Una tinción tricrómica puede colorear el tejido muscular de rojo y las fibras de colágeno de verde o azul. Las biopsias de hígado pueden tener fibras de colágeno finas entre las células del hígado y la cantidad de colágeno se puede estimar según el método de tinción. Los métodos tricrómicos ahora se utilizan para diferenciar el músculo del colágeno, las células alfa de la pituitaria de las células beta, la fibrina del colágeno y las mitocondrias en secciones de músculo congeladas frescas, entre otras aplicaciones. Ayuda a identificar aumentos en el tejido colágeno (es decir, cambios fibróticos) como en la cirrosis hepática .y diferenciar los tumores que surgen de las células musculares y los fibroblastos. [1]
Las técnicas de tinción tricrómica emplean dos o más tintes ácidos . Normalmente, los tintes ácidos teñirían las mismas proteínas básicas, pero aplicándolos secuencialmente se puede manipular el patrón de tinción. Se utiliza un poliácido (como el ácido fosfomolíbdico o el ácido tungstofosfórico ) para eliminar el tinte de forma selectiva. Se cree que los poliácidos se comportan como colorantes de alto peso molecular : desplazan del colágeno el colorante que se elimina fácilmente. [ cita requerida ]
Por lo general , se aplica primero un tinte rojo en ácido acético diluido para teñir todos los componentes. Luego se aplica un poliácido para eliminar el tinte rojo del colágeno y algunos otros componentes por desplazamiento. Se aplica un segundo tinte ácido (azul o verde) en ácido acético diluido que, a su vez, desplaza al poliácido, dando como resultado una tinción de colágeno de un color que contrasta con el tinte inicial utilizado. Si se van a teñir eritrocitos, se aplica un tinte amarillo o naranja de pequeño peso molecular antes de teñir con el tinte rojo. Por lo general, se aplica a partir de una solución saturada en etanol al 80% y, a menudo, junto con ácido pícrico (en sí mismo un tinte) y un poliácido. Los métodos aprovechan diferencias menores en la reacción del tejido a los tintes, densidad, accesibilidad, etc. [ cita requerida ]
Las tinciones tricrómicas en las que se aplican secuencialmente tintes y un poliácido se denominan tricromes de varios pasos . En los métodos de "un solo paso", todos los tintes, con o sin poliácido, se combinan en una sola solución. Uno de los enfoques más antiguos de un solo paso para la tinción tricrómica es el método de van Gieson, que tiñe el músculo y el citoplasma de amarillo y el colágeno de rojo. Otro es el tinte del tricrómico de Gömöri , que imita de cerca el tricrómico de Masson. En los métodos "yellowsolve", primero se aplica un tinte rojo en ácido acético diluido, luego la sección se deshidrata completamente para asegurar que no quede humedad. Luego, el tinte rojo es desplazado por un tinte amarillo en un solvente, como cellosolve (2-etoxi-etanol). El nombre yellowsolve es una combinación de términosamarillo y cellosolve . La floxina-tartrazina de Lendrum para inclusiones de células es un ejemplo de tinción de disolución amarilla. [ cita requerida ]