En biología , axénico describe el estado de una cultura en la que solo está presente una única especie, variedad o cepa de organismo y completamente libre de todos los demás organismos contaminantes . Los primeros cultivos axénicos fueron de bacterias o eucariotas unicelulares , pero también son posibles los cultivos axénicos de muchos organismos multicelulares. [1] El cultivo axénico es una herramienta importante para el estudio de organismos simbióticos y parásitos en un ambiente controlado.
Preparación
Los cultivos axénicos de microorganismos se preparan típicamente mediante subcultivo de un cultivo mixto existente. Esto puede implicar el uso de una serie de diluciones , en la que un cultivo se diluye sucesivamente hasta el punto en que las submuestras del mismo contienen solo unos pocos organismos individuales, idealmente solo un individuo (en el caso de una especie asexual ). Se permite que estos subcultivos crezcan hasta que se pueda determinar la identidad de sus organismos constituyentes. La selección de aquellos cultivos que consisten únicamente en el organismo deseado produce el cultivo axénico. La selección del subcultivo también puede implicar el muestreo manual del organismo objetivo de un frente de crecimiento no contaminado en un cultivo mixto, y usarlo como fuente de inóculo para el subcultivo. [2]
Los cultivos axénicos generalmente se controlan de forma rutinaria para asegurarse de que permanezcan axénicos. Un método estándar con los microorganismos es esparcir una muestra del cultivo en una placa de agar e incubarla durante un período de tiempo fijo. El agar debe ser un medio enriquecido que apoye el crecimiento de organismos "contaminantes" comunes. Estos organismos "contaminantes" crecerán en la placa durante este período, identificando cultivos que ya no son axénicos. [ cita requerida ]
Uso experimental
Como los cultivos axénicos se derivan de muy pocos organismos, o incluso de un solo individuo, son útiles porque los organismos presentes en ellos comparten un acervo genético relativamente estrecho . En el caso de una especie asexual derivada de un solo individuo, el cultivo resultante debe consistir en organismos idénticos (aunque procesos como la mutación y la transferencia horizontal de genes pueden introducir cierto grado de variabilidad). En consecuencia, generalmente responderán de una manera más uniforme y reproducible , simplificando la interpretación de los experimentos .
Problemas
El cultivo axénico de algunos patógenos es complicado porque normalmente prosperan dentro de los tejidos del huésped que exhiben propiedades que son difíciles de replicar in vitro . Esto es especialmente cierto en el caso de patógenos intracelulares . Sin embargo, la replicación cuidadosa de las características clave del entorno del hospedador puede resolver estas dificultades (por ejemplo , metabolitos del hospedador , oxígeno disuelto ), como ocurre con el patógeno de la fiebre Q , Coxiella burnetii . [3]
Ver también
Referencias
- ^ Thain, M .; Hickman, M. (1994). Diccionario de Biología (novena edición) . Penguin Books , Londres, Reino Unido. ISBN 0-14-051288-8.
- ^ JB Middlebrook; RO Bowman (9 de septiembre de 1963). "Preparación de cultivos axénicos de algas mediante el uso de una prensa francesa" . Revista de microbiología aplicada . 12 (1): 44–5. PMC 1058062 . PMID 14106939 .
- ^ Omsland, Anders; et al. (2009). "Crecimiento libre de células huésped de la bacteria de la fiebre Q Coxiella burnetii " . PNAS . 106 (11): 4430–4434. Código Bibliográfico : 2009PNAS..106.4430O . doi : 10.1073 / pnas.0812074106 . PMC 2657411 . PMID 19246385 .