Citocentrífuga

Equipo de laboratorio

Ejemplo de una citocentrífuga

Una citocentrífuga , a veces denominada citoespina , ^[1] es una centrífuga especializada que se utiliza para concentrar células en muestras de líquido en un portaobjetos de microscopio para que puedan teñirse y examinarse. ^{[2] Las} citocentrífugas se utilizan en diversas áreas del laboratorio clínico , como citopatología , hematología y microbiología , así como en investigación biológica. El método se puede utilizar en muchos tipos diferentes de muestras, incluidos aspirados con aguja fina , líquido cefalorraquídeo , serosos ylíquido sinovial y orina . ^[3]

Procedimiento

Para preparar frotis de citocentrífuga, se adjunta un conjunto de embudo al frente de un portaobjetos de microscopio. La superficie del conjunto del embudo que está en contacto con el portaobjetos está revestida con papel de filtro para absorber el exceso de líquido. Se colocan unas gotas de líquido en el embudo. El conjunto se coloca en la citocentrífuga, que opera con una fuerza baja (600 a 800 xg) para preservar la estructura celular. ^[4] La fuerza centrífuga empuja el líquido a través de la abertura del embudo y concentra las células en un área pequeña del portaobjetos. El proceso de centrifugación concentra las células aproximadamente veinte veces ^[5] y crea una monocapa de una célula de espesor, lo que permite la evaluación de la morfología celular. Luego, el portaobjetos se puede arreglar y teñir. ^[6][7]

Aplicaciones

Células de linfoma en líquido cefalorraquídeo

Algunas aplicaciones de las citocentrífugas incluyen:

• Realización de recuentos diferenciales de células en los líquidos corporales, como el líquido seroso , sinovial y cefalorraquídeo ^[4]
• Examen citopatológico de muestras líquidas, como fluidos corporales y aspirados con aguja fina ^{[3] [8]}
• Tinción de Gram de muestras líquidas para la identificación de microorganismos ^[9]

Limitaciones

El proceso de citocentrifugación puede hacer que las células parezcan distorsionadas. Las células ubicadas en el centro del frotis pueden verse comprimidas en comparación con las células de la periferia. Los núcleos celulares pueden desarrollar hendiduras, lóbulos o agujeros artefactos, ^[4] y el citoplasma puede aparecer vacuolado o desarrollar proyecciones irregulares. Los gránulos citoplasmáticos pueden empujarse hacia la periferia de la célula. Si el recuento de células es alto, las células pueden distorsionarse debido al hacinamiento; por lo tanto, las muestras con altos recuentos de células se diluyen antes de la preparación del frotis. ^[10]

Historia

El examen de las células en los fluidos corporales se realizaba históricamente utilizando un hemocitómetro , una cámara diseñada para contar células microscópicamente. Esta técnica estaba limitada por la escasa discriminación entre los tipos de células (las células solo podían clasificarse como mononucleares o polimorfonucleares) y el bajo número de células presentes en los fluidos corporales no concentrados. Además, esta técnica no produjo un registro permanente de la muestra. ^[10] En un artículo de 1966, Watson P. describió la primera citocentrífuga, llamándola "un aparato para concentrar células en suspensión en un portaobjetos de microscopio". ^[11] El dispositivo se vendió comercialmente en la década de 1970 y en 1983 fue patentado por Shandon (ahora Thermo Scientific). A partir de 2012, existen numerosas marcas de citocentrífugas en el mercado. ^[8]

Referencias

1. Linda McManus; Richard Mitchell (1 de agosto de 2014). Pathobiology of Human Disease: A Dynamic Encyclopedia of Disease Mechanisms . Ciencia de Elsevier. pag. 3365. ISBN 978-0-12-386457-4.
2. Mary Louise Turgeon (23 de marzo de 2015). Ciencia de laboratorio clínico de Linné & Ringsrud: conceptos, procedimientos y aplicaciones clínicas (7ª ed.). Elsevier Mosby. pag. 146. ISBN 978-0-323-22545-8.
3. Stokes, Barry O. (2004). "Principios de la citocentrifugación" . Medicina de laboratorio . 35 (7): 434–437. doi : 10.1309 / FTT59GWKDWH69FB0 . ISSN 0007-5027 . 
4. Nancy A. Brunzel (5 de noviembre de 2016). "Capítulo 17: Análisis de fluidos corporales" . Fundamentos del análisis de orina y fluidos corporales . Ciencias de la salud de Elsevier. págs. 356–58. ISBN 978-0-323-39636-3.
5. Katherine A. Galagan (2006). Atlas de color de fluidos corporales: una guía de campo ilustrada basada en pruebas de aptitud . Colegio de Patólogos Americanos . págs. 13-14. ISBN 978-0-930304-91-1.
6. Behdad Shambayati (17 de febrero de 2011). Citopatología . OUP Oxford. pag. 24. ISBN 978-0-19-953392-3.
7. Elaine M. Keohane; Larry Smith; Jeanine M. Walenga (19 de febrero de 2015). Hematología de Rodak: principios clínicos y aplicaciones . Ciencias de la salud de Elsevier. págs. 270–1. ISBN 978-0-323-32716-9.
8. Gary Gill (19 de octubre de 2012). "Capítulo 6: Citocentrifugación" . Citopreparación: principios y práctica . Springer Science & Business Media. págs. 73–84. ISBN 978-1-4614-4932-4.
9. Connie R. Mahon; Donald C. Lehman; George Manuselis (25 de marzo de 2014). Libro de texto de microbiología diagnóstica - E-Book . Ciencias de la salud de Elsevier. pag. 129. ISBN 978-0-323-29262-7.
10. Denise Harmening (2009). "Capítulo 30: examen de fluidos corporales: análisis cualitativo, cuantitativo y morfológico". Hematología clínica y fundamentos de la hemostasia (5ª ed.). FA Davis Company. págs. 720–757. ISBN 978-0-8036-1732-2.
11. Watson P (1966). "Una centrífuga de portaobjetos: un aparato para concentrar células en suspensión en un portaobjetos de microscopio" . J Lab Clin Med . 68 (3): 494–501. PMID 5922759 .