Dietilaminoetilcelulosa
La dietilaminoetilcelulosa ( DEAE-C ) es una resina cargada positivamente que se utiliza en la cromatografía de intercambio iónico , un tipo de cromatografía en columna , para la separación y purificación de proteínas y ácidos nucleicos. Las perlas de matriz de gel se derivatizan con dietilaminoetanol (DEAE) y bloquean proteínas o ácidos nucleicos cargados negativamente en la matriz. Las proteínas se liberan de la resina aumentando la concentración de sal del disolvente o cambiando el pH de la solución para cambiar la carga de la proteína.
DEAE-C se sintetiza mediante una reacción catalizada por álcali de celulosa (obtenida de tela de algodón ) con 2-clorotrietilamina, ilustrada a continuación: [1]
DEAE-C está comúnmente disponible comercialmente como DE52 y DE53. [2] Estas resinas se preparan prehinchadas [3] aunque los intercambiadores de celulosa se hinchan en un entorno básico fuerte para aumentar el acceso a los sitios de unión. [4]
DE52 tiene un pKa de 11,5. [ cita requerida ] El rango de amortiguamiento para la dietanolamina es 8.4-8.8, aunque el rango para DEAE-C varía entre los fabricantes. [5]
DEAE - Dextrano (DEAE-D) es un derivado de dextrano con carga positiva que se puede utilizar para la producción de vacunas , terapia génica , estabilización de proteínas, prevención de dislipidemia , agentes floculantes y muchas otras aplicaciones. [6] DEAE-D también se usa para transfectar células animales con ADN extraño. Se agrega a la solución que contiene ADN destinado a la transfección. Se une e interactúa con moléculas de ADN cargadas negativamente y, a través de un mecanismo desconocido, provoca la absorción de ácidos nucleicos por parte de la célula. Este procedimiento es muy adecuado para la transfección transitoria utilizada para diversos estudios de biología molecular .[7]
DEAE-C es un intercambiador de aniones débil. Este intercambio se utiliza para separar proteínas que tienen cargas levemente diferentes. Como todos los intercambiadores de aniones, la resina lleva una carga positiva que interactúa favorablemente con las cargas negativas. La carga positiva de la celulosa DEAE se debe a un grupo amino protonado. Para garantizar que la resina esté protonada y cargada positivamente, la cromatografía debe realizarse al menos 2 unidades de pH por debajo del pKa del grupo amino, 10. La fuerza del enlace entre la resina y la proteína depende en gran medida del rango de pH en el columna y el pI de la proteína de interés. La resina es un intercambiador débil porque solo se ioniza parcialmente en la mayoría de los valores de pH y una separación eficiente con cromatografía DEAE-Crequiere un rango de pH estrecho y específico. [8]
