La cromatografía de gotas en contracorriente (DCCC o DCC) fue introducida en 1970 por Tanimura, Pisano, Ito y Bowman. [1] DCCC se considera una forma de separación líquido-líquido, que incluye distribución en contracorriente y cromatografía en contracorriente., que emplea una fase estacionaria líquida contenida en una colección de columnas de vidrio verticales conectadas en serie. La fase móvil atraviesa las columnas en forma de gotitas. El aparato DCCC puede funcionar con la fase inferior estacionaria y la fase superior introducida en la parte inferior de cada columna. O puede ejecutarse con la fase superior estacionaria y la fase inferior introduciéndose desde la parte superior de la columna. En ambos casos, se permite que el trabajo de la gravedad influya en los dos líquidos inmiscibles de diferentes densidades para formar las gotitas distintivas que ascienden o descienden por la columna. La fase móvil se bombea a una velocidad que permitirá que se formen gotas que maximicen la transferencia de masa .de un compuesto entre las fases superior e inferior. Los compuestos que son más solubles en la fase superior viajarán rápidamente a través de la columna, mientras que los compuestos que son más solubles en la fase estacionaria permanecerán. La separación ocurre porque los diferentes compuestos se distribuyen de manera diferente, en una relación llamada coeficiente de partición , entre las dos fases.
El sistema de disolvente bifásico debe formularse cuidadosamente para que funcione correctamente en la columna DCCC. El sistema disolvente debe formar dos fases sin exceso de emulsificación para formar gotitas. Las densidades de las dos fases también deben ser lo suficientemente diferentes para que las fases pasen entre sí en la columna. Muchos sistemas de solventes DCCC contienen cloroformo y agua. El sistema disolvente usado en la publicación seminal se hizo a partir de cloroformo, ácido acético, y 0,1 M acuosa de ácido clorhídrico . [1] Muchos sistemas de disolventes posteriores se hicieron con cloroformo, metanol y agua, que a veces se representa como un sistema de disolventes ChMWat. [2] [3]Los sistemas de disolventes formulados con "n" - butanol , agua y un modificador como el ácido acético, la piridina o el n -propanol también han tenido cierto éxito en DCCC. [4] En algunos casos, se han utilizado sistemas de disolventes bifásicos no acuosos como acetonitrilo y metanol . [5] [6]
La principal diferencia entre DCCC y otros tipos de técnicas de cromatografía en contracorriente es que no hay una mezcla vigorosa de fases para mejorar la transferencia de masa de compuestos que les permite distribuirse entre las dos fases. En 1951, Kies y Davis describieron un aparato similar al DCCC. [7] Crearon una serie de tubos abiertos que estaban dispuestos en cascada para gotear una fase más densa a través de una fase estacionaria menos densa o, por el contrario, se podía introducir una fase menos densa en el fondo del tubo para gotear a través del fase más densa. En 1954, Kepes introdujo una columna de fraccionamiento que se parecía a una columna CCC dividida en cámaras con discos de plástico perforados. [8]AE Kostanyan y colaboradores han creado instrumentos similares de tipo DCCC que emplean columnas verticales que se dividen en particiones con discos porosos. [9] Una vez que las columnas se llenan con la fase estacionaria, la fase móvil se bombea, no de forma continua, sino en pulsos. El movimiento del solvente creado por una acción de bombeo pulsado crea la mezcla y el asentamiento que es común a la mayoría de las formas de cromatografía en contracorriente. [10]
Se ha empleado DCCC para separar una amplia variedad de fitoquímicos de sus extractos brutos. [2] [11] [12] [13] La larga lista de separaciones de productos naturales incluye: saponinas, [14] alcaloides , [15] glucósidos de sen , [4] monosacáridos , [4] glucósidos de tri- terpeno , [16] flavona glucósidos , [16] xantonas , [17] glucósidos iridoides , [17] vitamina B 12 , [18] lignanos , [19] ácido imbricatólico , [20] ácido gálico , [21] carotenoides , [5] y triterpenoides . [22]
Los instrumentos DCCC han sido fabricados y distribuidos comercialmente por Büchi y Tokyo Rikakikai (Eyela). [8]