El cultivo de embriones es un componente de la fertilización in vitro en la que los embriones resultantes se dejan crecer durante algún tiempo en un medio artificial.
Duración
La duración del cultivo de embriones puede variar, lo que confiere diferentes etapas de embriogénesis en la transferencia de embriones . Las principales etapas en las que se realiza la transferencia de embriones son la etapa de escisión (día 2 a 4 después de la coincubación ) o la etapa de blastocisto (día 5 o 6 después de la coincubación ). [1]
Los embriones que alcanzan la etapa celular del día 3 se pueden analizar para detectar defectos genéticos específicos o cromosómicos antes de una posible transferencia mediante diagnóstico genético preimplantacional (DGP). El cultivo de embriones hasta la etapa de blastocisto confiere un aumento significativo en la tasa de nacidos vivos por transferencia de embriones , y no hay evidencia de una diferencia entre los grupos en las tasas de embarazo acumuladas. [2] El día de transferencia 2 en lugar del día 3 después de la fertilización no presenta diferencias en la tasa de nacidos vivos . [3]
El hermanamiento monocigótico no aumenta después de la transferencia de blastocisto en comparación con la transferencia de embriones en etapa de escisión . [4]
Hay probabilidades significativamente más altas de nacimiento prematuro ( razón de probabilidades 1.3) y anomalías congénitas ( razón de probabilidades 1.3) entre los nacimientos de embriones cultivados hasta la etapa de blastocisto en comparación con la etapa de escisión. [1]
Técnicas
El cultivo de embriones se puede realizar en un medio de cultivo artificial o en un cocultivo endometrial autólogo (encima de una capa de células del revestimiento uterino de la propia mujer). Con medio de cultivo artificial, puede existir el mismo medio de cultivo durante todo el período ( medio de monocultivo ), o se puede utilizar un sistema secuencial , en el que el embrión se coloca secuencialmente en diferentes medios, con diferentes formulaciones en función de la diferente concentración y composición. del líquido tubárico y uterino en relación con el cambio en la actividad metabólica del embrión durante su desarrollo. [5] Por ejemplo, cuando se cultiva hasta la etapa de blastocisto, se puede usar un medio para el cultivo hasta el día 3 y, a partir de entonces, se usa un segundo medio para el cultivo. [6] Los medios simples o secuenciales son igualmente efectivos para el cultivo de embriones humanos en la etapa de blastocisto. [7] Los medios de cultivo de embriones artificiales contienen básicamente glucosa, piruvato y componentes que proporcionan energía, pero la adición de aminoácidos, nucleótidos, vitaminas y colesterol mejora el rendimiento del crecimiento y desarrollo embrionario. [8] También se pueden agregar sustancias como antioxidantes, antibióticos, macromoléculas, hormonas y factores de crecimiento. [5] También se encuentran disponibles métodos para permitir el cultivo dinámico de embriones con flujo de líquido y movimiento de embriones. [9] Un nuevo método en desarrollo utiliza el útero como incubadora y los fluidos intrauterinos naturales como medio de cultivo al encapsular los embriones en un vaso intrauterino permeable. [10]
Una revisión en 2013 de un metanálisis de medios de cultivo de FIV disponibles comercialmente no pudo identificar un medio específico que fuera superior en términos de resultado del embarazo. [11]
Se ha demostrado que el uso de concentraciones bajas de oxígeno del 5% en lugar de aproximadamente el 20% en la atmósfera aumenta la tasa de nacidos vivos a una probabilidad relativa de 1,24, sin ninguna evidencia de un mayor riesgo de embarazos múltiples, abortos espontáneos o anomalías congénitas. [12]
Sistema de amortiguación
El control y la regulación del pH son obligatorios para el cultivo de embriones in vitro. Los medios de cultivo se pueden clasificar según el tipo de tampón utilizado:
Medio tamponado con CO₂ / bicarbonato: utiliza el mismo sistema tampón fisiológico que rodea a las células de los mamíferos. Requerir el uso de incubadoras de CO₂ al 5-7%;
Medio tamponado con fosfato: no requiere ambiente de CO₂. Parece tener efectos perjudiciales en el desarrollo embrionario in vitro;
Medio tamponado con HEPES: utilizado como medio tamponado para la recogida de ovocitos humanos y la manipulación de embriones;
Medio amortiguado con MOPS: al igual que HEPES, tiene la ventaja potencial de que la capacidad de amortiguación depende menos de la temperatura. [13]
Temperatura
Si bien se ha planteado la hipótesis de que la incubación a una temperatura inferior a 37 ° C puede ser una recreación más precisa de la temperatura en el tracto reproductivo femenino, la evidencia es incierta si las diferentes temperaturas para el cultivo de embriones tienen diferentes efectos sobre el embarazo o las tasas de nacidos vivos. [14]
Riesgos
Los estudios en animales han detectado anomalías epigenéticas en embriones sometidos a cultivo de embriones, lo que indica la necesidad de optimizar los procedimientos. [15]
Referencias
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