La hemaglutinina (HA) de la influenza humana es una glicoproteína de superficie necesaria para la infectividad del virus de la influenza humana. La etiqueta HA se deriva de la molécula HA correspondiente a los aminoácidos 98-106. Se ha utilizado ampliamente como etiqueta de epítopo general en vectores de expresión . Se han diseñado muchas proteínas recombinantes para expresar la etiqueta HA, que no parece interferir con la bioactividad o la biodistribución de la proteína recombinante. Esta etiqueta facilita la detección, el aislamiento y la purificación de la proteína de interés. [1]
La etiqueta HA no es adecuada para la detección o purificación de proteínas de células apoptóticas ya que es escindida por Caspasa-3 y / o Caspasa-7 después de su secuencia DVPD, lo que hace que pierda su inmunorreactividad . [2] El etiquetado de proteínas endógenas con HA-tag utilizando CRISPR se logró recientemente in vivo en neuronas diferenciadas . [3]
Secuencia
Las secuencias de ADN para la etiqueta HA incluyen: 5 'TAC CCA TAC GAT GTT CCA GAT TAC GCT 3' o 5 'TAT CCA TAT GAT GTT CCA GAT TAT GCT 3'
La secuencia de aminoácidos resultante: YPYDVPDYA (Tyr-Pro-Tyr-Asp-Val-Pro-Asp-Tyr-Ala).
Ver también
Referencias
- ^ "Anticuerpo etiqueta anti-HA" . Merck Millipore .
- ^ Schembri L, Dalibart R, Tomasello F, Legembre P, Ichas F, De Giorgi F (febrero de 2007). "La etiqueta HA se escinde y pierde inmunorreactividad durante la apoptosis". Métodos de la naturaleza . 4 (2): 107–8. doi : 10.1038 / nmeth0207-107 . PMID 17264856 .
- ^ Mikuni T, Nishiyama J, Sun Y, Kamasawa N, Yasuda R. "Alto rendimiento, mapeo de alta resolución de la localización de proteínas en el cerebro de los mamíferos mediante la edición del genoma in vivo" . Celular . 165 (7): 1803–1817. doi : 10.1016 / j.cell.2016.04.044 . PMC 4912470 . PMID 27180908 .
Otras lecturas
- Field J, Nikawa J, Broek D, MacDonald B, Rodgers L, Wilson IA, Lerner RA, Wigler M (mayo de 1988). "Purificación de un complejo de adenilil ciclasa sensible a RAS de Saccharomyces cerevisiae mediante el uso de un método de adición de epítopo" . Biología Molecular y Celular . 8 (5): 2159–65. doi : 10.1128 / MCB.8.5.2159 . PMC 363397 . PMID 2455217 .